[发明专利]肽基免疫治疗剂

说明书

本发明涉及一种肽基免疫治疗剂。更具体地说，本发明涉及可用于具有与来自变应原的特定抗原肽结合的HLA类II分子的变态反应病人的肽基免疫治疗剂，它包含特定抗原肽作为有效成分。另外，本发明涉及用于识别HLA类II分子的试剂，它包含特异性地与特定的HLA类II分子反应的抗原肽。

变态反应是一种由抗体或敏化细胞对抗原产生应答导致的不希望的免疫反应。导致变态反应的抗原被具体地称为变应原。变应原包括广范围的物质，如花粉、螨虫、动物表皮、昆虫、食物、药物和化学品。变态反应通常特征在于包括对变应原的即刻反应以及随后的迟缓反应两个步骤。在变态反应的早期，变应原特异性的IgE抗体与外周血中的嗜碱性粒细胞和组织中的肥大细胞表面结合。当变应原进入体内时，嗜碱性粒细胞或肥大细胞表面的IgE抗体与变应原交叉反应。结果，释放包括组胺、前列腺素和白三烯的炎症介质。在对这些炎症介质产生应答时，局部聚集的淋巴细胞、单核细胞、嗜碱性粒细胞和嗜伊红性粒细胞被活化并释放导致组织损伤和组织中其它各种应答的介质，从而启动迟缓反应。

业已熟知变态反应受细胞因子控制。细胞因子不仅参与IgE产生的调控，而且参与效应细胞的活化和分化。这得到这样一观察结果的支持，即血液中的变应原特异性的IgE的水平是恒定的，即使变态反应病人的临床症状已通过脱敏作用得以缓解。

为治疗变态反应疾病的方法的脱敏作用包括对变态反应病人给药少量抗原(例如从柳杉花粉或螨虫中提取的抗原)并逐渐增加剂量。脱敏作用的成功被认为是减少的变态反应特异性T细胞的应答所造成的。脱敏作用被推测导致T细胞耐受性(T细胞无反应性)，结果不产生对于推进变态反应性级联放大非常重要的细胞因子。对变态反应的研究集中在早期的变应原特异性免疫反应，尤其是控制T细胞对变态反应应答的机理上。对包括变应原的外源抗原的变态反应性应答取决于免疫系统中的抗原呈递细胞而被启动。包括B细胞、巨噬细胞和树突细胞的抗原呈递细胞将外源抗原、外源抗原片段掺入抗原肽中(T细胞表位肽)，并在细胞表面表达断裂的抗原与MHC类II(人的HLA类II)一起来为抗原特异性CD4阳性辅助T细胞(Th细胞)提供抗原。

HLA类II分子(DR，DQ和DP)为由α、β链组成的细胞表面抗原。DR分子的α链由HLA-DRA基因编码；DR分子的β链由HLA-DRB1、HLA-DRB3、HLA-DRB4或HLA-DRB5基因编码。DQ分子的α和β链分别由HLA-DQA1和HLA-DQB1基因编码，而DP分子的α和β链分别由HLA-DPA1和HLA-DPB1基因编码。除开HLA-DRA，每个基因包含许多等位基因。由α和β链组成的容纳抗原肽的袋状结构显示高度的多形性，它们的结构相互稍微有所不同。结果，与袋结合并被提供至T细胞的抗原肽的种类受其结构的限制。这可能导致各个免疫反应的不同。

接受抗原信息，通过T细胞受体(TCR)受HLA类II分子限制的细胞被活化并分泌各种细胞因子以自身增殖和使B细胞分化为浆细胞，从而诱导抗体的产生。同时，由非TCR分子介导的第二信号(共同刺激信号)对于活化T细胞是必需的。相反，没有该信号，则诱导Th细胞对抗原的免疫耐受性(June，C.等：今日免疫学，15：321，1994)。

对变应原的T细胞应答的减少与脱敏作用的成功相关。例如，与未治疗的病人相比，对美味食品发生变态反应的已有效脱敏十年的病人中的对美味食品变应原“Amb a 1”的体外T细胞应答显著降低。类似地，在对猫表皮抗原“Fel d 1”发生变态反应的病人中，对Fel d 1特异性的T细胞应答明显降低，因为脱敏作用显示了作用。在皮肤试验中，这种降低相对于敏感性的降低。而且，在治疗期间，Fel d 1特异性的IgG和IgE抗体保持恒定水平。这些结果表明可制备直接针对抗原特异性T细胞的变态反应治疗剂。

生化分离和分析技术的发展使得能纯化各种变应原。尤其是，已克隆了一百多种变应原基因，并且已在最近几十年中使用分子生物学和遗传工程方法确定了它们的一级结构。还确定了其中一些变应原的T细胞表位位点。