[发明专利]激活人体呈递抗原细胞的方法,被激活的人体呈递抗原细胞及其用途

说明书

                      发明背景1.发明领域

本发明涉及新型被激活的人体呈递抗原细胞，体外激活人体呈递抗原细胞的方法，用该被激活的人体呈递抗原细胞治疗癌症和传染病包括AIDS的方法，以及应用该被激活的人体呈递抗原细胞制备用于这些治疗的药物的方法。

2.相关技术的公开

对癌症患者的治疗疗法一直有各种对策，包括肿瘤病灶的手术摘除、化学疗法、放射治疗和免疫疗法。但是，这些对策的治愈率并不如期望的那样高。因此，强烈要求开发新的能在治疗癌症上提供提高治愈率的治疗剂和方法。已经知道作为呈递抗原细胞(APC)成员的巨噬细胞、B细胞和树突细胞是免疫反应的必需细胞。最近，一种应用APCs，特别是树突细胞诱发癌症免疫在治疗癌症上可能是有效的概念(Grabbe，S.等，1995，Immunol.Today，16，117)已引起极大关注。

已经知道几种由鼠制备树突细胞的方法，例如从脾脏(Clowley，M.等，1989，Cell.Immunol.，118，108)、从骨髓(Inaba，K.等，1992，J.Exp.Med.，176，1693)和从表皮(该源于表皮的树突细胞被称作“朗格汉斯细胞”)(Witmer-Pack，M.等，1987，J.Exp.Med.，166，1487)制备。另外，已证实：在将肿瘤细胞移植到受试者上之前和之后用肿瘤抗原激发(pulsing)由鼠骨髓制备的树突细胞以及给与受试者激发的树突细胞可以诱发肿瘤免疫(Celluzzi，C.M.等，1996，J.Exp.Med.，183，283；Paglia，P.等.，1996，J.Exp.Med.，183，317)。

下列从外周血或脐带血中制备人体APCs，特别是树突细胞的方法是熟知的：一种使用来自外周血单核细胞中的抗下列细胞的抗体将FcR⁺细胞、T细胞、B细胞和NK细胞从人体外周血中取出得到APCs的方法(Hsu等，1996，Nature Med.，2，52)；以及一种将从中取出CD19⁺B细胞和CD2⁺T细胞的人体外周血单核细胞中的贴壁细胞与粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)培养约一周的方法(Sallusto，F.等，1994，J.Exp.Med.，179，1109)。已报道这些人体外周血衍生的APCs具有增加异源的和自体的MLR(混合白细胞反应)的作用。另一方面，从人体脐带血中或骨髓细胞中制备APCs，已知的方法是使用GM-CSF和肿瘤坏死因子-α(THF-α)制备从在脐带血或骨髓里发现的CD34⁺细胞中的  APCs(Santiago-Schwartz，F.等，1992，J.Leukocyte Biol.，52，274；Caux，C.等，1992，Nature，360，258)。然而，虽然通过以上提到的方法从人体脐带血中或骨髓细胞中制备的APCs具有增加异源的MLR的作用，但是它们没有(Santiago-Schwartz，F.等)或，如果有，也是极小的(Caux，C.等)增加自体的MLR的作用。

近来，已证实：用已经用肿瘤抗原激发的APCs的疗法对治疗B细胞淋巴瘤患者是有效的(Hsu，F.J.等，1996，Nature Med.，2，52)。即一种通过将从B细胞淋巴瘤患者的外周血中制备的APCs在体外与B细胞淋巴瘤抗原一起培养，再将培养的APCs给予B细胞淋巴瘤患者的治疗B细胞淋巴瘤患者的方法获得成功。

如此典型疗法中所示，其中将APC用肿瘤抗原激发的方法可能对治疗癌症非常有效，如果该癌症可被它们的肿瘤抗原清晰鉴定的话，如B细胞淋巴瘤。但是以上所提的方法要花费大量时间和费用，因为肿瘤抗原一般对个别患者是专一的，因此，必须针对相应的患者，而且必须大量制备这些专一的肿瘤抗原用以激发APCs。此外，由于对多数癌症患者来讲，鉴定他们的肿瘤抗原是不可能的，所以用肿瘤抗原激发APCs的方法的应用范围是有限的。鉴于以上情况，为了应用被认为非常有效的治疗癌症的采用APCs的疗法(以后称作“APC疗法”)，对尽可能多的患者来讲，一直强烈要求开发一种制备在没有肿瘤抗原帮助下对治疗癌症有效的人体APCs的方法。