[发明专利]抗水痘－带状疱疹病毒基因63产物的疫苗

说明书

本发明涉及用于治疗和预防感染了水痘-带状疱疹病毒(VZV)的个体的带状疱疹的组合物，并涉及水痘感染的预防和治疗。本发明组合物含有由VZV基因63编码的蛋白或其免疫活性衍生物。本发明进一步涉及含有与VZV基因63相对应的DNA或RNA的组合物。

水痘病毒是一种人α-疱疹病毒，能导致两种人类疾病：初次感染VZV导致儿童水痘，此后病毒变为潜伏并常常重激活(通常几十年后)产生带状疱疹。患水痘时，病毒透入外周神经系统并潜伏直至以痛苦的带状疱疹形式重激活。由于病毒是潜伏的，大部分病毒基因的表达被抑制。由于带状疱疹形式的重激活常发生在年老的或免疫损伤的个体中，据信细胞介导的免疫在控制潜伏状态中起着关键作用。

VZV感染具有存在最小量的自由病毒的特征。在潜伏状态和重激活时，病毒主要在细胞内。相应地，甚至使用高浓度中和抗体和依赖于细胞介导免疫的病毒控制也不能预防复发疾病。为了通过接种获得保护，不但需要诱导抗体反应，还需要细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应。一种有效的疫苗应当使细胞毒性T淋巴细胞具有一旦出现潜伏病毒重激活征兆时尽可能早的起作用的能力。

由于通过细胞毒性T淋巴细胞CTL的抗原识别机制包括天然抗原分解成肽，蛋白分解片段与主要组织相容性复合体(MHC)分子的结合以及复合体向细胞表面的排出，任何病毒编码多肽而不只是那些膜内在蛋白质例如糖蛋白可以是T细胞介导反应的潜在靶。然而，由于VZV基因组除了外部糖蛋白以外还编码几种非结构蛋白质和内部病毒颗粒蛋白质，导致大量的潜在细胞毒性T淋巴细胞靶并且不知哪种蛋白质是最相关的。

水痘带状疱疹病毒基因组由71个开放阅读框组成，编码68种蛋白质。已知病毒DNA的序列(普通病毒学期刊(J.Gen Virol)67 1759-1816)。水痘带状疱疹病毒基因63编码预计分子量为30.5千道尔顿(KDa)的立即早期蛋白质(Debrus等,病毒学期刊(J.of Virology)69(5),1995第3240页)。该基因开始于110581(起始密码子)直至111414(终止密码子)。该基因另一个反方向的拷贝发现于碱基119316至118483之间。相当罕见地，发现了IE63蛋白质表达于大鼠模型中，潜伏状态时在神经元中。该蛋白质已经作为融合蛋白在大肠杆菌(E.coli)中表达(Debrus等)。

已经发现VZV IE63蛋白质仅在潜伏感染的人三叉神经节和胸神经节的神经元胞质中检测到。这是第一个鉴定到的在人神经系统中于潜伏状态下表达的α-疱疹病毒蛋白质。

此外，本发明者发现这种蛋白质是免疫系统的重要靶，特别是T细胞反应的靶，从而可用于预防和治疗VZV感染。特别是，预防已被VZV感染的病人的带状疱疹。

相应地，本发明提供了一种含有水痘-带状疱疹病毒IE63蛋白质或其免疫学功能等价物和药物可接受载体的药组合物。

这是这种蛋白质的首次医学应用并且从而本发明相应地提供VZV IE63蛋白质或其免疫学功能等价衍生物用于药物中。

本发明的另一方面是提供了一种治疗易患有或正患有VZV感染的人的方法，包括施用安全和有效量的根据本发明的组合物。

每一疫苗剂量中的蛋白质量是以能够在典型疫苗中诱导免疫保护反应而没有显著的有害副反应的量来选择的。这一量将随使用的特定免疫原以及它怎样呈递而变化。通常，预计每剂包含1-1000微克蛋白质，优选地2-100微克，最优选地4-40微克。通过包括观察受试者中适当的免疫应答的标准研究可确定特定疫苗的最佳量。在初次接种后，可使对象以充分间隔接受一次或多次加强剂量免疫。

除了向易患有VZV感染的人接种外，还可使用本发明的药物组合物，免疫治疗感染VZV的病人，以预防或显著降低复发疾病，带状疱疹病的频率，严重程度或持久性等。

在本发明的疫苗中，可直接使用VZV IE63蛋白质的水溶液。或者，可将经过或未经冻干的VZV IE63蛋白质与任何各种已知的佐剂相混合。这类佐剂包括但不限于，氢氧化铝，胞壁酰二肽和皂角苷诸如Quil A，特别是QS21或3脱酰单磷酰类脂A(3D-MPL)。优选地诱导TH1应答的佐剂或佐剂系统是优选的。能够优先地刺激TH1细胞应答的佐剂描述于国际专利申请WO94/00153和WO95/17209中。

一种特别优选的佐剂包括QS21，一种来源于皂树(Quillaja SaponariaMolina)树皮的高效液相色谱纯化的非毒性组分，和3去氧酰化单磷酰类脂A(3D-MPL)，任选地与一种水包油乳剂一起。