[发明专利]新型肌醇六磷酸酶及编码该新型肌醇六磷酸酶的基因

权利要求书

1、一种当用植酸作底物时，米氏常数为10-30μM的肌醇六磷酸酶。

2、根据权利要求1的肌醇六磷酸酶，具有以下物理化学特征：

<1>分子量(通过SDS-PAGE)：用内切糖苷酶H处理后为60KDa；

<2>最适pH值：pH5.0-6.5；

<3>最适温度：45-65℃时，具最大活性；

<4>底物特异性：可作用的底物有，植酸，对硝基苯基磷酸，D-葡萄糖-6-磷酸，果糖-6-磷酸，D-myo-肌醇-1,4,5-三磷酸，甘油磷酸和腺苷三磷酸；及

<5>等电聚焦：pI4.7-5.4。

3、根据权利要求1或2的肌醇六磷酸酶，其中的肌醇六磷酸酶是选自如下的蛋白质：具有SEQ ID NO:1,2和3所示氨基酸序列的蛋白；或具有SEQ ID N0:1,2和3所示氨基酸序列，其中一个或多个氨基酸被替换、删除或添加并且当将植酸用作底物时，其Km值为10-30μM的具有肌醇六磷酸酶活性的蛋白。

4、根据权利要求1或2的肌醇六磷酸酶，其中的肌醇六磷酸酶源于黑曲霉属的微生物。    

5、根据权利要求1或2的肌醇六磷酸酶，其中属于黑曲霉属的微生物选自黑曲霉SK57(FERM BP-5473)或黑曲霉SK92(FERM BP-5481)。

6、根据权利要求1-3中任何一项的肌醇六磷酸酶，其中的肌醇六磷酸酶具有糖链。

7、一种基因，当用植酸作底物时，其所编码的肌醇六磷酸酶的米氏常数为10-30μM。

8、根据权利要求7的基因，其中的肌醇六磷酸酶具有以下物理化学特征：

<1>分子量(通过SDS-PAGE)：用内切糖苷酶H处理后为60KDa；

<2>最适pH值：pH5.0-6.5；

<3>最适温度：45-65℃时，具最大活性；

<4>底物特异性：可作用的底物有植酸，对硝基苯基磷酸，D-葡萄糖-6-磷酸，果糖-6-磷酸，D-myo-肌醇-1,4,5-三磷酸，甘油磷酸和腺苷三磷酸；及

<5>等电聚焦：pI4.7-5.4。

9、根据权利要求7或8的基因，其中的基因编码的蛋白是选自如下的蛋白质：具有SEQ ID NO:1,2和3所示氨基酸序列的蛋白；具有SEQ ID NO:1,2和3所示氨基酸序列，其中一个或多个氨基酸被替换、删除或添加并且当将植酸用作底物时，其Km值为10-30μM的具有肌醇六磷酸酶活性的蛋白。

10、根据权利要求7或8的基因，其中的基因选自SEQ ID NO:4和5所示的DNA。

11、根据权利要求7或8的基因，其中的基因源于黑曲霉属的微生物。

12、根据权利要求11的基因，其中属于黑曲霉属的微生物选自黑曲霉SK57(FERM BP-5473)或黑曲霉SK92(FERM BP-5481)。

13、通过将一个DNA片段引入一个载体而得到重组DNA，其中的DNA片段编码一种当用植酸作底物时，米氏常数为10-30μM的肌醇六磷酸酶的基因。

14、根据权利要求13的重组DNA，其中的肌醇六磷酸酶具有以下物理化学特征：

<1>分子量(通过SDS-PAGE)：用内切糖苷酶H处理后为60KDa；

<2>最适pH值：pH5.0-6.5；

<3>最适温度：45-65℃时，具最大活性；

<4>底物特异性：可作用的底物有，植酸，对硝基苯基磷酸，D-葡萄糖-6-磷酸，果糖-6-磷酸，D-myo-肌醇-1,4,5-三磷酸，甘油磷酸和ATP；及

<5>等电聚焦：pI4.7-5.4。