[发明专利]细胞组合物

说明书

                    发明领域

本发明涉及细胞组合物。更具体地说，本发明涉及纯化的造血干细胞组合物。

                    发明背景

由于细胞生物学的发展，已揭示了不同细胞的生理性质与功能，发展了把细胞本身用于医疗目的的方法。例如，虽然化疗和放疗已用于治疗癌症，但有时这种治疗方法导致正常细胞致死性的损害，特别是对骨髓细胞。于是为了减少这种危险，提出了自体骨髓移植，即在处理前从病人体内收获骨髓细胞，在处理后送还到该病人体中。此外，近来已发展了通过转移所需外源基因到靶细胞中的称为基因疗法的靶细胞转化技术。例如，当转移一多重抗药性基因到骨髓细胞时，所述细胞获得多重抗药性，因此使运用药物治疗癌症成为可能；由于这些药物对骨髓细胞有剧烈的细胞毒性，因而到现在为止它们没被用于这样的治疗。

                    发明目的

这样，在医学领域，包含合适细胞的组合物或包含适当修饰细胞的组合物是非常重要的。然而，在靶细胞组合物被癌细胞污染的情况下，不能得到充分的治疗效果；特别是当上述多重抗药性基因被转移到癌细胞污染的细胞组合物时，污染的癌细胞也获得多重抗药性，这对所需的癌症治疗产生不利的影响。

本发明的目的是提供一适宜于基因治疗的靶细胞组合物，以及一种获得该组合物的方法；在该组合物中癌细胞已被大致除掉了。

                   发明概述

本发明人发现，通过使用特异性诱导癌细胞细胞凋亡的细胞凋亡诱导物，只有造血干细胞组合物中污染的癌细胞能被特异性地消除掉；而且在用细胞凋亡诱导物处理后，通过转移一所需的外源基因到造血干细胞中去，能安全地进行基因治疗。如此，本发明就完成了。

即本发明的第一方面是：细胞组合物，它包含大致无癌细胞的造血干细胞。特别是包含造血干细胞的细胞组合物，通过用对癌细胞特异性的细胞凋亡诱导物从其中已大致消除了癌细胞。其代表例为包含这种造血干细胞的缓冲液。

所述组合物中造血干细胞的量不特别地限制，可根据组合物的特殊用途而确定。另外，该缓冲液可以包含其它的造血细胞、基质细胞等等，并且它可以包含所述造血干细胞的培养基质、一种造血干细胞生长因子、一种干细胞分化因子、一种造血干细胞保护剂等等。

本发明的第二方面是：获得包含大致无癌细胞的造血干细胞的细胞组合物的一种方法，特别是包括通过用对癌细胞特异性的细胞凋亡诱导物选择性地消除癌细胞的步骤的方法。

本发明的第三方面是：包含大致无癌细胞的、转移了一外源基因的造血干细胞的细胞组合物，特别是包含造血干细胞的下述细胞组合物，所述细胞组合物通过用对癌细胞特异性的细胞凋亡诱导物已大致消除了其中的癌细胞，并于其中转入了一外源基因。

细胞凋亡是细胞死亡的一种方式，它不同于坏死。从形态学的观点来看，细胞凋亡通过核浓缩、细胞皱缩、空泡形成、细胞表面光滑化、细胞破碎等等而产生，并且是程序化细胞死亡的一种代表方式(Nikkei Biotech编辑，Nikkei Biotechnology New Terminology Dictionary，第4版，第21-22页)。

按照本发明，通过使用细胞凋亡诱导物，则所需的、已转入一外源基因的细胞可移植到宿主中，而没有把基因转入癌细胞这样的危险。

                  本发明的详细描述

在本发明中所用的细胞凋亡诱导物就它对癌细胞有特异性细胞凋亡诱导活性而言，不限于特定的一种；细胞凋亡诱导物的选择性可通过用正常细胞和癌细胞来确定。细胞凋亡诱导物的实例包括：硫酸化多糖和/或它们的分解产物的诱导物、包含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物的糖类化合物和/或它们的分解产物的诱导物以及包含由式(1)表示的4,5-二羟基-2-环戊烯-1-酮的诱导物。

按照本来已知的方法，可以将单独的细胞凋亡诱导物或与一已知的药学上可接受的载体一起配制成药物制剂。该药学上可接受的载体可根据制剂特定的形式而适当地选择；例如，如果是固体制剂的话，可用乳糖、蔗糖、甘露(糖)醇、淀粉、羧甲基纤维素、无机盐等等。通过将上述制剂加入细胞组合物中或将它溶解到细胞组合物中而进行细胞与上述细胞凋亡诱导物的接触。

用于本发明的硫酸化多糖的实例包括岩藻多糖、硫酸葡聚糖等等。