[发明专利]纯化的精子表面抗原、其单克隆抗体,以及它们的应用

说明书

发明领域

本发明涉及一种精子表面抗原、抗该抗原的一种单克隆抗体以及所述单克隆抗体和抗原的应用。具体地说，通过将该抗原用作免疫原，本发明提供了一种避孕用疫苗，以及可用于免疫测定中的一个标准，该单克隆抗体可用作杀精子剂和诊断试剂。

相关工作背景

有关较好避孕方法的开发一直受到广泛关注。一项已广泛开发的技术是使用杀精子剂，其实质上是一种化学屏障，可阻止精子穿过子宫或卵细胞，或者抑制其活性，从而避免受精。得到极广泛使用的一种杀精子剂是去污剂壬苯聚醇-9。多个报道表明，使用这种去污性杀精子剂，会提高妇女发生尿道感染和子宫颈阴道炎的机率。McGroarty等，泌尿学杂志，152(3):831-833(1994)。作为化学去污剂的另一种选择，作者已提出，单克隆抗体在局部应用中，如在局部杀精子剂的应用中可能是一种比较安全的活性剂。参见如Cone等，美国生殖免疫学杂志，32:114-131(1994)。研究结果表明，除了可降低甚至消除不需要的免疫反应外，人单克隆抗体应能作为安全的杀精子剂，因为它们的剂量和应用持续时间可很好控制，局部释放可将全身性暴露降至最低，并且可以对单克隆抗体进行选择以利于安全性和有效性。因此，作为局部杀精子剂而递送的精子活性单克隆抗体可导致期望的抗受精效果，且同时并不产生应用去污剂杀精子剂时所伴生的负面副效应。一般参见Alexander，科学美国，9月刊：136-141(1995)。因此，本领域的一个目标仍然是应用单克隆抗体提供一种安全有效的杀精子剂。

已对大量的单克隆抗体作为潜在的精子反应性试剂作了研究。其中得到研究的一种抗体是抗人精子单克隆抗体S19。这一单克隆抗体的建立参见Anderson等，生殖免疫学杂志，10:231-257(1987)。此抗体是通过用人精子匀浆物免疫小鼠而得到的。在本发明人的实验室中发现此IgG1单克隆抗体与人精子发生很强的凝集反应，随后该单克隆抗体被递交到世界卫生组织-抗精子单克隆抗体主办工作室进行进一步的鉴定。该抗人精子单克隆抗体S19很强地凝集人精子，抑制人精子和透明带之间的紧密结合，阻断精子穿过宫颈粘液。Anderson，出处同前；Cone，出处同前；Mahoney等，生殖免疫学杂志，19:269-285(1991)。在录像带中可看到该抗体对精子的强凝集作用。这些发现表明相关的S19抗原在受精过程中参与配子的相互作用，可能是导致免疫性不孕的自身抗体的靶，可作为开发避孕用疫苗的一个候选者。

然而，不管是作为研究工具，还是作为避孕剂，S19抗体都并未得到进一步的开发。迄今仍无S19抗体的保藏，它也未被“人源化”以降低免疫反应的机率。该单克隆抗体未得到详细的研究，迄今为止，它基本上仍是一个科学盲区。

还已知其它单克隆抗体和精子抗原。在美国专利5436137(Herr等)中讨论了单克隆抗体MHS-10和与其结合的抗原SP-10(一种顶体内抗原)，它是用于精子诊断和用作避孕用疫苗的用途的一个候选者，所述专利引入本文作为参考。然而，不同于SP-10抗原，与S19单克隆抗体结合的抗原-精子凝集抗原1(sperm agglutination antigen-1,SAGA-1)似乎位于人精子的整个表面。这一发现有力地暗示该单克隆抗体可结合并凝集于整个精子表面的多个位点。

应用SP-10抗原的疫苗的开发性工作正在进行中。类似地，世界上许多研究者正在分析开发出基于精子抗原的避孕用疫苗的可能性。参见如Aitken等，英国医学杂志，49:88-99(1993),Freemerman等，生物生殖，50:615-621(1994)和Herr，受精控制；pp431-452(第二版，1994)。在这一点上，有关人绒毛膜促性腺激素(hCG)用作妇女避孕用疫苗的工作仍在进行中。Talwar，免疫学现代观念(Current Opinion inImmunology),6:698-704(1994)和欧洲专利86304274.3。对此潜在疫苗正在进行临床疫苗试验，而hCG免疫原早已用作堕胎药，也就是说，接种该疫苗而引起的免疫响应会导致早期胚胎或胎儿的流产。对许多人来说，这可能是一种不能接受的避孕药。