[发明专利]细胞内半胱氨酸和谷胱甘肽浓度的评价有效
申请号: | 97197585.X | 申请日: | 1997-09-03 |
公开(公告)号: | CN1268977A | 公开(公告)日: | 2000-10-04 |
发明(设计)人: | J·F·克劳福德 | 申请(专利权)人: | 研究发展基金会 |
主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02;C12N5/00 |
代理公司: | 上海专利商标事务所 | 代理人: | 陈文青 |
地址: | 美国内*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞内 半胱氨酸 谷胱甘肽 浓度 评价 | ||
1.一种用于测定淋巴细胞内谷胱甘肽胞内功能水平和进行所述淋巴细胞抗氧化功能生物化学分析的细胞培养基,
所述的培养基包含:
含有以下成份的无血清缓冲液:
糖,选自葡萄糖和生物学上能够在所述淋巴细胞内产生葡萄糖的化合物;
生物可利用形式的泛酸,胆碱或能够在所述淋巴细胞内产生胆碱的生物可利用形式的物质;
生物可利用形式的无机离子,包括氯、磷酸根、钙、镁、钾、钠和铁;
L-丁硫因-[S.R.]-亚砜亚胺(L-Buthionine-[S.R.]-Sulfoximine);
去离子水;
和含量能有效刺激所述淋巴细胞的促细胞分裂原;
所述无血清缓冲液的pH约6.8至7.6;
所述细胞培养基的特征在于能够有效测定所述淋巴细胞内谷胱甘肽的胞内功能和生物化学分析所述淋巴细胞的抗氧化功能。
2.根据权利要求1所述的细胞培养基,其中所述的培养基补充了选自以下物质组的补充营养素:生物可利用形式的氨基酸和维生素,在所述补充营养素中删除了待测的某营养素、或让此待测营养素以有限量或抑制量存在其中。
3.根据权利要求1所述的细胞培养基,其中所述的维生素选自生物素、叶酸或生物可利用形式的叶酸、烟酰胺或烟酸、核黄素、硫胺素、维生素B6和维生素B12,以及能够在细胞内生成以上物质的化合物;其中所述的氨基酸或生物学上能够生成这些氨基酸的化合物包括L-精氨酸、L-半胱氨酸、L-谷胺酰胺、甘氨酸、L-组氨酸、L-异亮氨酸、 L-亮氨酸、L-赖氨酸、L-甲硫氨酸、L-苯丙氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸和L-缬氨酸,氨基酸成组存在,各自的量都不超过抑制浓度。
4.根据权利要求1所述的细胞培养基,其中所述的L-丁硫因-[S.R.]-亚砜亚胺以约5μM至约500μM的浓度存在。
5.根据权利要求1所述的细胞培养基,其中补充了选自以下物质组的一种或多种刺激性营养素:丙酮酸、腺嘌呤和肌醇,或能够在所述淋巴细胞内产生上述物质的化合物,它们的浓度能够激发几乎是最大强度的反应。
6.一种测定个体内谷胱甘肽胞内功能水平和生物化学分析细胞抗氧化功能的方法,它包括以下步骤:
将所述个体的淋巴细胞接种到权利要求1所述的细胞培养基中;
培养接种后的细胞培养基;和
将淋巴细胞的反应与个体对照组淋巴细胞的平均反应进行比较。
7.一种用于测定人淋巴细胞内半胱氨酸胞内功能水平和进行人淋巴细胞内抗氧化功能生物化学分析的细胞培养基,所述的培养基包含:
含有以下成份的无血清缓冲液:
糖,选自葡萄糖或生物学上能够在所述淋巴细胞内产生葡萄糖的化合物;
生物可利用形式的泛酸,胆碱或能够在所述淋巴细胞内产生胆碱的生物可利用形式的物质;
生物可利用形式的无机离子,包括氯、磷酸根、钙、镁、钾、钠和铁;
氢过氧化枯烯;
去离子水;
N-乙酰-L-半胱氨酸和
和含量能有效刺激所述淋巴细胞的促细胞分裂原;
所述无血清缓冲液的pH约6.8至7.6;
所述细胞培养基的特征能够有效测定营养缺陷、不足和失调,并能够生物化学分析淋巴细胞的抗氧化功能。
8.根据权利要求7所述的细胞培养基,其中所述的培养基补充了选自以下物质组的补充营养素:生物可利用形式的氨基酸和维生素,在所述补充营养素中删除了待测的某营养素、或让此待测营养素以有限量或抑制量存在其中。
9.根据权利要求7所述的细胞培养基,其中所述的维生素选自生物素、叶酸或生物可利用形式的叶酸、烟酰胺或烟酸、核黄素、硫胺素、维生素B6和维生素B12,以及能够在细胞内生成以上物质的化合物;其中所述的氨基酸或生物学上能够生成氨基酸的化合物包括L-精氨酸、L-半胱氨酸、L-谷胺酰胺、甘氨酸、L-组氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-赖氨酸、L-甲硫氨酸、L-苯丙氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸和L-缬氨酸,氨基酸成组存在,各自的量都不超过抑制浓度。
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