[发明专利]含有血浆蛋白药物的制备方法

说明书

本发明涉及应用柠檬酸盐血浆或者含有柠檬酸盐的血浆级分物，制备一种含血浆蛋白药物的方法，该药物基本不含有非需要金属。

人类白蛋白以其35-50g/l的浓度为血浆中的主要成分。其治疗性应用早已被熟知，例如当血液或血浆突然丧失时，或者当血管舒缩神经调节功能衰竭时，可以应用白蛋白。因为其20％(25％)的白蛋白溶液的渗透压约为正常人类血清的4倍(5倍)，白蛋白的作用原理主要是其维持渗透压平衡的能力。

人类白蛋白制剂通过将人类血浆多次级分获得，例如通过孔恩氏级分，或者通过重组合方法制备而得。由于制备过程中所使用的材料各不相同，或者在白蛋白溶液在玻璃容器中的贮藏过程中，会有铝进入白蛋白制剂，使得相应制剂中铝的终含量已经相当可观。

铝为自然界最常见的元素之一，早先时代常常与人体各种疾病联系在一起，尤其是神经系统和骨骼系统的疾病。尽管肺和胃肠道形成了针对铝吸收的有效屏障，当病人静脉内用药时，此屏障发生紊乱，那么可能存在于所使用药物中的铝可以畅通无阻地被吸收。例如D.S.Milliner等曾经报道(新英格兰医学杂志(1985),312期，165-167页)：几种含有大量铝的白蛋白制品导致骨骼疾病或大脑炎。另外，越来越多地认为铝与阿尔茨海默氏痴呆有关。

因此有许多的努力，力图减少例如白蛋白制剂中的铝含量。例如由US-PS5372997已知一种减少白蛋白制剂中铝含量的方法，该方法一方面应用了专门的玻璃器皿，另一方面是应用阴离子交换剂进行处理。通过应用特殊的无铝玻璃以及通过用硫酸铵溶液或硫酸将内表面进行去碱化处理，可以防止铝从玻璃器皿中溶解出来。此外还可以应用阳离子交换剂进行处理。在对白蛋白溶液进行加热处理时，添加合适的稳定剂，例如钠-N-乙酰色氨酸或辛酸钠。

由EP-0484464-B1已知一种从与其结合的多价金属离子清除白蛋白方法，即用一价金属离子，例如铵离子或碱金属离子替代之。

由US-PS5250663已知可获得基本上不含铝的白蛋白的一种方法。该方法由含白蛋白的级分物，例如以孔恩氏级分物开始，首先进行各种沉淀处理，然后在辛酸钠作为稳定剂和10-20％乙醇存在的条件下进行热震荡处理。最后将溶液进行超滤处理和渗滤处理。渗滤后去除了铝和其它杂质，作为盐可使用弱盐溶液应用于渗滤处理，例如3％NaCl，乙酸钠或者在某些情况下应用辛酸钠溶液。但是在此应用辛酸盐的情况下没有盐的交换，因为渗滤前即已添加了辛酸盐作为热震荡处理的稳定剂；也就是说制剂中始终存在着相当大剂量的柠檬酸盐离子。

例如J.C.May等(1992)(血液之声，62期，65-69页)所说明的，柠檬酸盐离子对铝具有高度亲和力，其存在对铝的吸收起主要作用(对此还可以参见例如R.B.Martin(1986)，无机生物化学杂志，28期，181-187页)，因此仅仅柠檬酸盐的存在，对于所有的制剂而言都是一个金属离子污染的危险因素。

EP-0696595-A1说明了将辛酸盐应用于白蛋白级分的一种方法，该方法将柠檬酸盐离子在DEAE-交联葡聚糖-色谱分离的过程中去除。这里并非是简单的柠檬酸盐离子与其它离子的交换，而是一个价格昂贵的柠檬酸盐的分离问题，因为DEAE-交联葡聚糖-阴离子交换剂的价格昂贵。

本发明的目的是，寻求一种新的简单可行的方法，可以避免和减少含血浆蛋白药物中的非需要金属，应用此方法既可以在制备方法的过程中去除非需要金属，又可以避免或减少在含金属器皿中贮藏时成品制剂的污染。

通过本文开头所提及方式的方法达到了此目的，它包括以下步骤：

-在非沉淀条件下，使在含有血浆蛋白的溶液中的柠檬酸盐和任选

结合在柠檬酸盐上的金属，与水溶性单-或二羧酸盐、或者一种

有机的单-或二羧酸发生交换，

-获得血浆蛋白或血浆蛋白类和

-制备药物。

令人惊异地现已发现：正是含血浆蛋白的溶液中所含有的阴离子，对去除金属阳离子起着决定性的作用。

与US-PS5250663中说明的方法相反，不仅在含柠檬酸盐的溶液或含柠檬酸盐的沉淀中添加辛酸钠，而且还用一种水溶性单-或二羧酸盐替代出柠檬酸盐，该柠檬酸盐一方面可以携带有复合形式的结合金属离子，而且还师职于在制备方法过程中或成品药物的贮藏过程中溶解出非需要金属。