[发明专利]三组件嵌合的反义寡核苷酸

权利要求书

1.一种嵌合的反义寡核苷酸，它包含：一个5′端；一个3′端；以及11-59个5′到3′连接的核苷酸，这些核苷酸独立选自2′-脱氧硫代磷酸酯核苷酸、2′-修饰的硫代磷酸酯核苷酸、2′-修饰的磷酸二酯核苷酸、2′-修饰的P-烷氧基磷酸三酯核苷酸，其中：

a)所述寡核苷酸掺入了RNA酶H激活区，该激活区有3-12个无隔的2′-脱氧硫代磷酸酯连接的碱基；

b)最5′端的5′到3′核苷酸键是硫代磷酸酯键或P-烷氧基磷酸二酯键；

c)最3′端的5′到3′核苷酸键是硫代磷酸酯键或P-烷氧基磷酸二酯键，或3′端被封闭；和    

d)寡核苷酸含有不超过12个无隔的2′-脱氧硫代磷酸酯键。

2.根据权利要求1所述的寡核苷酸，其中3′端不受3′到3′硫代磷酸酯连接的核苷酸封闭。

3.根据权利要求1所述的寡核苷酸，其中3′端被含有3′到3′硫代磷酸酯连接的核苷酸部分封闭。

4.根据权利要求1所述的寡核苷酸，其中3′端被含有3′到3′磷酸二酯连接的核苷酸的部分封闭。

5.根据权利要求4所述的寡核苷酸，其中最3′端的5′到3′核苷酸键是硫代磷酸酯键或P-乙氧基磷酸三酯键。    

6.根据权利要求4所述的寡核苷酸，其中最5′端的5′到3′核苷酸键是硫代磷酸酯键或P-乙氧基磷酸三酯键。

7.根据权利要求1所述的寡核苷酸，其中2′-修饰的硫代磷酸酯核苷酸在3′端和5′端。

8.根据权利要求1所述的寡核苷酸，其中RNA酶H激活区位于5′端。

9.根据权利要求8所述的寡核苷酸，其中最3′端的5′到3′核苷酸键是硫代磷酸酯键或P-乙氧基磷酸三酯键。

10.根据权利要求9所述的寡核苷酸，其中最3′端的两个5′→3′核苷酸间连键是独立的硫代磷酸酯键或P-乙氧基磷酸三酯键。

11.根据权利要求9所述的寡核苷酸，其中RNA酶H激活区与最3′端的5′→3′核苷酸键毗连。

12.根据权利要求11所述的寡核苷酸，其中2′-修饰的磷酸二酯核苷酸是2′-甲氧基或2′-氟代核苷酸。

13.根据权利要求11所述的寡核苷酸，它还包含至少13个2′-甲氧基磷酸二酯核苷酸。

14.根据权利要求11所述的寡核苷酸，它有15-50个核苷酸。

15.根据权利要求14所述的寡核苷酸，它还包含至少8个2′-甲氧基磷酸二酯核苷酸。

16.根据权利要求14所述的寡核苷酸，它还包含至少13个2′-甲氧基磷酸二酯核苷酸。

17.根据权利要求1所述的寡核苷酸，其中RNA酶H激活区包括3′端。

18.根据权利要求1所述的寡核苷酸，其中2′-修饰的磷酸二酯核苷酸选自2′氟代和2′-甲氧基核苷酸。

19.根据权利要求4所述的寡核苷酸，其中RNA酶H激活区在5′端，其后是4-40个5′到3′连接的2′-甲氧基核苷酸，且3′端被3′到3′磷酸二酯连接的脱氧核糖核苷酸封闭。

20.一种在含RNA酶H的细胞中特异性地断裂RNA的方法，该方法包括给予有效量的与RNA互补的寡核苷酸，所述寡核苷酸包含：一个5′端；一个3′端；以及11-59个5′到3′连接的核苷酸，这些核苷酸独立选自2′-脱氧硫代磷酸酯核苷酸、2′-修饰的硫代磷酸酯核苷酸、2′-修饰的磷酸二酯核苷酸、2′-修饰的P-烷氧基磷酸三酯核苷酸，其中：

a)所述寡核苷酸掺入了RNA酶H激活区，该激活区有3-12个无隔的硫代磷酸酯连接的2′-脱氧核苷酸；

b)最5′端的5′到3′核苷酸键是硫代磷酸酯键或P-烷氧基磷酸二酯键；

c)最3′端的5′到3′核苷酸键是硫代磷酸酯键或P-烷氧基磷酸二酯键，或3′端被封闭；和

d)寡核苷酸含有不超过12个无隔的硫代磷酸酯连接的2′-脱氧核苷酸。