[发明专利]慢性疲劳综合症的诊断无效
申请号: | 97198605.3 | 申请日: | 1997-09-19 |
公开(公告)号: | CN1232508A | 公开(公告)日: | 1999-10-20 |
发明(设计)人: | R·J·舒哈多尼克 | 申请(专利权)人: | 坦普尔大学 |
主分类号: | C12Q1/34 | 分类号: | C12Q1/34;C12Q1/68;G01N33/53 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人: | 陈文平 |
地址: | 美国宾*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 慢性 疲劳 综合症 诊断 | ||
1.一种诊断慢性疲劳综合症的方法,包括检测患者样品中一种约30kDa的RNA酶L的存在。
2.根据权利要求1的方法,其包括:
(a)在自然条件下对患者样品中的蛋白质按分子量分离;
(b)在分离后的蛋白质中检测一种具有RNA酶L活性的约30kDa的蛋白质。
3.根据权利要求1或2方法,其中所述样品包括血液或其中的其一部分。
4.根据权利要求3方法,其中所述样品包括外周血单核细胞的胞浆提取物。
5.根据权利要求2到4任意一项的方法,其中RNA酶L的活性的检测包括检测水解28S和/或18S RNA后的特异裂解产物的形成。
6.根据权利要求2到4任意一项的方法,其中RNA酶L活性的检测包括检测poly(U)-3’-pCp的水解。
7.根据权利要求6的方法,其中包含在所说的poly(U)-3’-pCp上的标志包括一种放射性标志。
8.根据权利要求7的方法,其中所述标记的poly(U)-3’-pCp是poly(U)-3’-[32P]pCp。
9.一种诊断慢性疲劳综合症的方法,包括:
(a)将外源蛋白酶抑制剂存在下制备的患者样品与一种探针接触,该探针中包含一种如式(Ⅰ)所示的带有可检测标志的化合物或该化合物的水溶性盐,接触条件足以形成所述标记探针化合物与样品中2’,5’-寡腺苷酸结合蛋白的共价结合物:
其中
m是从0到3的整数,
n是从1到3的整数,
每个R1和R2彼此独立于其他的R1和R2,为氢或N3,条件是至少一个R1或R2是N3;
(b)将包含所说共价结合物的样品与一种抗体接触,该抗体能与样品中的RNA酶L种类相结合;
(c)通过凝胶电泳分离所述样品中的蛋白质;和
(d)检查分离的蛋白质,寻找标记蛋白质,它:
(ⅰ)已经与标记探针化合物形成共价结合物,
(ⅱ)已经与所说抗体结合;
根据十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,存在约37kDa表观分子量的标记蛋白质,可以诊断为慢性疲劳综合症。
10.根据权利要求9的方法,其中所说的形成共价结合物的条件包括用紫外光照射所说的样品,使所说的探针化合物共价结合到样品中的2’,5’-寡腺苷酸-结合蛋白上。
11.根据权利要求9或10的方法,其中探针化合物中的n等于1。
12.根据权利要求9或11的方法,其中探针化合物中的m等于1。
13.根据权利要求9到12中任意一项的方法,其中探针化合物中的各个R1是氢。
14.根据权利要求13的方法,其中探针化合物是5’-0-磷酰基-腺苷酰-(2’→5’)-腺苷酰-(2’→5’)-8-叠氮基腺苷酸或其盐。
15.根据权利要求9到14中任意一项的方法,其中所述样品包括血液或其一部分。
16.根据权利要求15的方法,其中所述样品包括外周血单核细胞的胞浆提取物。
17.根据权利要求9到16中任意一项的方法,其中所述探针化合物上的可检测标志是一种放射标志。
18.根据权利要求17的方法,其中所述放射标志是32P原子。
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