[发明专利]以核小体为基础的抗肿瘤组合物

说明书

                      发明背景

本发明涉及使用核小体治疗和预防癌症。

在寻求对癌症的治疗中，研究人员已尝试激发患各种类型疾病的个体中的有效抗肿瘤免疫反应。为了研究成功，人们首先必需鉴定有效刺激免疫系统的肿瘤抗原。已鉴定了某些肿瘤，例如黑色素瘤的特异性抗原(Darrow等，免疫学杂志，142:3329-3335,1989；Cox等，科学264:716-719,1994)。而且，已描述了可被T细胞识别的人癌相关性抗原(Kantor等，国家癌症研究所杂志，84:1084-1091,1992；Ioannides等，免疫学杂志，151:3696-3703,1993；Tsang等，国家癌症研究所杂志，87:982-990,1995)。然而，可经过用特异性抗原制品免疫接种进行治疗的肿瘤数极其有限。迄今，尚未成功实现有效抗许多不同类型的恶性细胞的疫苗。

                  本发明概述

本文描述的发明以这样一种发现为基础，即抗核自身抗体(ANAs)特异性结合存在于肿瘤细胞表面的核小体。这样命名这些抗体是因为它们识别正常情况下在细胞核中发现的抗原(“抗核”)且它们可自体产生(“自身抗体”)，例如在老年人或具有自身免疫疾病的人类(或其它动物)中。

以标准技术从健康成年Balb/c小鼠获得的脾细胞融合产生称为2C5的单克隆ANA。已表明该抗体与包括来自人类淋巴肿瘤(例如，MOLT-4,HEL92.1.7,Raji，和U-937细胞)和非淋巴肿瘤(例如，SK-BR3细胞(来自乳腺癌)和PC3细胞(来自前列腺癌))的许多肿瘤细胞表面反应。而且，已表明2C5抑制体内淋巴瘤的形成。因此该抗体的体内诱导提供了预防或治疗赘生性细胞生长的方法。

因此，本发明鉴定了一种经过施用诱导产生足以抑制赘生性细胞生长的抗核自身抗体的核小体来治疗哺乳动物(例如人类)的赘生性细胞生长的方法。核小体可从真核细胞纯化或按本文所述使用组蛋白及哺乳动物或细菌DNA在体外重建。核小体可以在生理上可接受的载体，稀释剂或赋形剂中含有或不含佐剂以基本上纯化的形式施用。另外，核小体可以按例如本文所述的方法进行脂质体包裹。而且可在肿瘤出现前或后用药。

也在本发明范围内的还有用于在哺乳动物中诱导抗核自身抗体生产的以核小体为基础的组合物。组合物由核小体(可从真核细胞中分离或在体外重建)和药用上可接受的载体，稀释剂或赋形剂组成。重建的核小体可含有真核或细菌DNA，且可在脂质体中包装，用于例如，作为疫苗施用。

用本文公开的组合物预防或治疗的赘生性细胞生长可以是恶性或良性生长。恶性细胞生长可以产生淋巴瘤，如Burkitt’s淋巴瘤，pre-B淋巴瘤，或组织细胞淋巴瘤，腺癌，例如乳腺，前列腺或肾腺癌，红白血病，胸腺瘤，骨原性肉瘤，肝细胞瘤，黑色素瘤，脑肿瘤，胶质细胞瘤，卵巢或子宫瘤，胰腺肿瘤，或胃或胃肠道内的肿瘤。

本发明可特别有益于认为有形成癌症危险的个体，首先是因为预防性治疗可在出现肿瘤症状前开始。有患病危险的个体包括对一种或多种癌症有遗传诱因的个体和出于疏忽接触核辐射或致癌物的个体。

“核小体”指组蛋白与DNA形成的复合物，包括完整的，天然存在的核小体，人工制备的“重建”核小体，和这些核小体的抗原部分。核小体天然存在于真核细胞核中且可按下文所述在体外重建。天然存在的核小体当用电子显微镜观察时，在DNA链上作为珠状体存在于切片组织中。

提到核小体时本文使用的术语“重建”指人工制备核小体的过程，例如，下文所述的盐逐步透析法。

用核小体免疫宿主来增强免疫系统抗肿瘤潜力的优势在于预期可产生多克隆抗体，它识别结合核小体的肿瘤细胞表面的一些决定簇。因此，抗核小体自身抗体应比施用外源性单克隆抗体能更有效地介导宿主免疫系统的效应器抗肿瘤功能。

除非另有说明，本文使用的所有技术和科学术语与本发明所属领域的普通技术人员通常的理解具有相同的意义。尽管在本发明的实践或试验中可使用与本文所述相似或相当的方法和材料，但合适的方法和材料在下面进行了描述。如有抵触，本说明书，包括定义将会处理。另外，材料，方法和实施例仅仅是说明性的而不打算用于限制。

本发明的其它特征和优点从下面的详细描述和权利要求书来看将是显而易见的。

                 附图的简要描述