[发明专利]含有高质量生理活性的家兔发痘组织的制造方法

说明书

本发明提供了使用各种痘病毒，可得到具有抗过敏作用、镇痛作用或镇静作用发痘组织的优良制造方法。

目前已有报导，从感染了牛痘病毒等痘毒的家兔的皮肤组织配制的提取物，对于过敏性疾病是有效的，而且对于自律神经的异常兴奋也显出了镇静作用。另外，还知道此物质中具有阻碍胰激肽原酶生成的活性物质、抑制了与胰激肽原酶激肽系的、作为发痘物质的缓激肽的生成，显示了镇痛作用。

此外，在药学杂志第96卷10号第1247～1254页(1976年)上也报导了从使用精制痘苗，00而感染的家兔组织得到发痘组织的方法。

但是，目前还不知道获得收率高、含有高质量的生理活性物质的发痘组织的详细方法。

本发明的目的在于向家兔的组织上接种各种痘病毒，提供一种获取高收率和高质量的发痘组织的方法。该发痘组织含有可作为医药原料使用的生理活性物质。

本发明中的痘病毒，可举出以母牛痘病毒、公牛痘病毒、猪痘病毒等为代表的索状病毒亚科类的病毒。

此外，还认为家兔的体重增加到约4千克，体重越重、皮肤量也越增加，则发痘组织的收量也多，但是研究的结果，体重超过3.0千克时，发痘组织的增加缓慢，以2.5千克左右其生产性为好。

对于接种方法，也可采用以往的切种式接种法，但研究的结果，接种在皮内，收量会增加，可得到对胰激肽原酶生成阻碍活性高值的发痘组织。

接种后的发痘，通常从第1天就可以看到，每天都有进展，其高峰在第5～6天。发痘组织的采取时期，一般认为在其高峰期最好，但是应在发痘状态最好之前，即接种后的第4天前后，其收量最佳。

迄今为止，关于为得到发痘组织而向皮内接种的数量尚没有任何报导，我们研究的结果，发现了对一只动物的接种部位为50～200处，最好是150个点，这样可使发痘状态良好，皮内中，收量高，并可明显地提高阻碍胰激肽原酶的生成活性。

此外，得到的发痘组织，即使在加热灭菌及冷冻保存后也显示出对胰激肽原酶生成的阻碍活性。

以下通过实施例具体地说明本发明，但本发明不受这些实施例的限制。

实施例1

将2.5千克的健康成熟的家兔用戊巴比妥钠注射液麻醉，固定在固定器上后，用电动推子等刮掉家兔的体毛，但要注意不要伤及皮肤。

接着，用含有70％的乙醇溶液的脱脂棉等擦洗除去体毛的皮肤，消毒后，印150个印记，每两个印记之间相隔约3厘米，在印记处，将用磷酸盐缓冲氯化钠液配制成的10⁷个/毫升的牛痘病毒稀释液，以每次0.2毫升接种到皮内。

接种牛痘病毒稀释液后，第4日从固定架上取下，屠杀后，用剪刀、手术刀及镊子采取发痘的皮肤。

另外，对于采取的发痘的皮肤进行蒸汽加热灭菌处理。

实施例2

将3.0千克的健康成熟的家兔用戊巴比妥钠注射液麻醉，固定在固定器上后，用电动推子等刮掉家兔的体毛，但要注意不要伤及皮肤。

接着，用含有70％的乙醇溶液消毒除去体毛的皮肤后，以在约3厘米的间隔处加以标记印共200处，在该处将用磷酸盐缓冲氯化钠液配制成的107个/毫升的牛痘病毒稀释液，以每次0.2毫升接种到皮内。

以下与实施例1相同地进行灭菌处理后，得到发痘组织。

实施例3

将2.0千克的健康成熟的家兔用戊巴比妥钠注射液麻醉，固定在固定器上后，用电动推子等刮掉家兔的体毛，但要注意不要伤及皮肤。

接着，用含有70％的乙醇溶液消毒除去体毛的皮肤后，以在约4厘米的间隔处加以标记印共50处，在该处将用磷酸盐缓冲氯化钠液配制成10⁶个/毫升的牛痘病毒稀释液，以每次0.2毫升接种到皮内。接种后第3日后采取发痘的皮肤。

以下与实施例1相同地进行灭菌处理后，得到发痘组织。

参考例1

将2.5千克的健康成熟的家兔与实施例1相同地处理，以在约3厘米的间隔处加以标记印共30处，在该处将用磷酸盐缓冲氯化钠液配制成10⁷个/毫升的稀释液，以每次0.2毫升接种到皮内。接种后第4日，从固定架上取下，屠杀后采取发痘的皮肤。对于采取的发痘的皮肤，与实施例1相同地进行蒸汽加热灭菌处理。

参考例2