[发明专利]产气荚膜梭状芽孢杆菌疫苗

权利要求书

1．在野生型β-毒素中不存在的，在它的氨基酸序列中携带突变的产气荚膜梭状芽孢杆菌β-毒素的脱毒免疫原性衍生物或其免疫原片段。

2．根据权利要求1所述的产气荚膜梭状芽孢杆菌β-毒素的衍生物或其免疫原片段，其特征是突变为替代突变。

3．根据权利要求1所述的产气荚膜梭状芽孢杆菌β-毒素的衍生物或其免疫原片段，其特征为突变是插入和/或缺失。

4．根据权利要求1-3所述的产气荚膜梭状芽孢杆菌β-毒素的衍生物或其免疫原片段，其特征是突变定位于β-毒素的中性和亲水部分之间的转换区中。

5．根据权利要求1-4的产气荚膜梭状芽孢杆菌β-毒素的衍生物或其免疫原片段，其特征是突变定位于位置62,182,197或氨基酸编号80-103,145-147,281-291,295-299之间的区域之一或与肽前导甲硫氨酸相关的氨基酸位置292下游。

6．根据权利要求1-5的产气荚膜梭状芽孢杆菌β-毒素的衍生物或其免疫原片段，其特征是突变定位于氨基酸编号80-82,95-97,101-103或287-291之间的区域之一。

7．含有突变的DNA片段的核苷酸序列，所述的突变的DNA片段编码权利要求1-6所述的脱毒的免疫原产气荚膜梭状芽孢杆菌β-毒素或其免疫原片段。

8．含有权利要求7所述的核苷酸序列的产气荚膜梭状芽孢杆菌细菌。

9．基于革兰氏阳性细菌的表达系统，所述的革兰氏阳性细菌不是产气荚膜梭状芽孢杆菌，所述表达系统含有编码野生型产气荚膜梭状芽孢杆菌β-毒素的基因。

10．基于革兰氏阳性细菌的表达系统，所述的革兰氏阳性细菌不是产气荚膜梭状芽孢杆菌，其中所述的革兰氏阳性细菌含有权利要求7所述的核苷酸序列。

11．用于抵抗产气荚膜梭状芽孢杆菌感染的疫苗，其特征是它含有权利要求1-6所述的产气荚膜梭状芽孢杆菌β-毒素的衍生物或其免疫原片段，和生理学可接受载体。

12．根据权利要求11所述的疫苗，其特征是它含有佐剂。

13．用于抵抗产气荚膜梭状芽孢杆菌感染的疫苗，其特征是它含有活的重组载体生物体，所述的载体生物体携带权利要求7所述的DNA片段。

14．用于抵抗产气荚膜梭状芽孢杆菌感染的疫苗，其特征是它含有活的减毒的产气荚膜梭状芽孢杆菌菌株，其中天然β-毒素基因被权利要求7所述的核苷酸序列替代。

15．根据权利要求11-14所述的疫苗，其特征是它另外含有来自其它病原体的免疫原。

16．根据权利要求15所述的疫苗，其特征是所述的来自其它病原体的免疫原选自含有大叶性肺炎放线杆菌，伪狂犬病病毒，猪流行性感冒病毒，猪细小病毒，可传播的胃肠炎病毒，轮状病毒，大肠杆菌，猪丹毒杆菌，出血败血性巴斯德氏菌，支气管炎博德特氏菌，沙门氏菌种类，猪肺炎支原体，副猪嗜血菌和类螺旋杆菌的细菌的组。

17．用于制备天然产气荚膜梭状芽孢杆菌β-毒素的方法，其特征是权利要求7所述的含有编码所述β-毒素的DNA片段的核苷酸序列在革兰氏阳性细菌中表达，所述的革兰氏阳性细菌不是梭状芽孢杆菌。

18．用于制备权利要求1-6所述的产气荚膜梭状芽孢杆菌β-毒素的衍生物的方法，其特征是权利要求7所述的含有编码β-毒素的衍生物的DNA片段的核苷酸序列在革兰氏阳性细菌中表达。

19．根据权利要求17或18所述的方法，其特征是革兰氏阳性细菌选自乳球菌，乳杆菌，明串珠菌，片球菌，链球菌，肠球菌，葡萄球菌，芽孢杆菌，八叠球菌，瘤胃球菌或利斯特氏菌属的组。

20．制备用于抵抗产气荚膜梭状芽孢杆菌感染的疫苗的方法，其特征是所述的方法包括混合权利要求1-6所述的产气荚膜梭状芽孢杆菌β-毒素的衍生物和生理学可接受载体。