[发明专利]环氧乙烷－环氧丙烷无规共聚物的纯化方法

说明书

本发明涉及一种环氧乙烷-环氧丙烷无规共聚物(EOPO)的纯化方法。

目前对用双水相系统(ATPS)提取生物物质的研究大部分进行到将生物物质提取到聚合物相，无论从纯化的角度还是从聚合物回收的角度都要求两者能够分开。从聚合物相中回收生物物质，循环利用聚合物以降低成本是这项新技术能否工业化的关键。最近，利用诱导相分离法，使到聚合物与生物物质分离，从而回收聚合物受到了人们的注意。

所谓温度诱导相分离，就是在加热聚合物溶液时，聚合物能与它的水溶液分离，从而形成了含水的上相和含聚合物的下相。这种现象发生时的温度称为聚合物溶液的浊点(cloud point)。10％的PEG(Mn=20000)浊点为111．7℃，而相同浓度的环氧乙烷-环氧丙烷无规共聚物的浊点是50℃。相分离发生在生物分子保持活性的最佳温度(37-56℃)。通过改变环氧乙烷和环氧丙烷的摩尔比或者加入Na₂SO₄等均能降低聚合物的浊点。

在用EOPO作为成相剂处理红霉素发酵液时，可以通过温度诱导相分离法回收EOPO。但同时却还存在一个问题，在用ATPS处理发酵液时，杂蛋白在上相(EOPO)和下相(盐相)的分配系数为2-5，如果只通过温度诱导回收EOPO，杂蛋白及其它一些杂质会富集在EOPO相，约8％左右。曾采用温度诱导相分离法循环回收三次后的EOPO来提取发酵液中的红霉素时，发现乳化现象严重，提取出的红霉素效价降低，说明此时的EOPO相中已富含杂质，不能再继续使用。

EOPO的传统纯化工艺报道很少，其方法为，将粗品溶于水并加入二氯甲烷，EOPO被萃取至二氯甲烷相中，溶剂在65℃下真空蒸发，得到精制的EOPO。但此法不适用于双水相系统，因为在处理液中的非挥发性杂质，如杂蛋白、红霉素降解产物等，在真空蒸发除去二氯甲烷后，这物质仍会在EOPO相中。

本发明的目的是提供一种工艺较为简单，纯化效果好，适用范围广的一种环氧乙烷-环氧丙烷无规共聚物的纯化方法。

为了达到上述目的本发明采取了下列措施，它的步骤为：

a．在60ml的环氧乙烷-环氧丙烷无规共聚物废液中加入10～60ml的醋酸丁酯，置于45～80℃水浴中，系统完全达到温度后，剧烈搅拌，使环氧乙烷-环氧丙烷无规共聚物萃取至酯相中，静置1～5小时分相；

b．取上相55ml，过滤除去不溶性杂质，55ml滤液中加入15～150ml蒸馏水，将系统温度降至0～10℃并剧烈搅拌，使环氧乙烷-环氧丙烷无规共聚物反萃至水相中，保持温度不变，静止分相；

c．取下相65ml，水浴加热至48～85℃，静止分相；

d．取下相25ml得到纯化的环氧乙烷-环氧丙烷无规共聚物。

本发明的优点：

1．工艺简单易行

主要根据温度变化提纯EOPO，萃取或反萃均采用水一醋酸丁酯系统，原料易得，场地占用少，工艺简单易行。

2．纯化效果好

在不同的温度下，EOPO分别被萃取至水相或反萃到酯相，使得水溶性或酯溶性杂质均能被除去，所得到的EOPO有很高的纯度。

3．适用范围广

所回收提纯的EOPO，已经多次处理过红霉素发酵液，所含的杂质较为复杂，有无机物，有机溶剂，生物小分子，生物大分子等，但得到的EOPO纯度却很高，说明该方法也适用于其它场合。

4．对双水相分离工艺中EOPO的回收。因为在步骤d得到的下相中，主要含有75％左右的EOPO，25％左右的水，以及极少量的醋酸丁酯，此时已经可以直接作为ATPS的成相剂，无需再将水除去。在实际应用中，建议用温度诱导相分离方法回收使用EOPO不超过三次，否则由杂质富集，难以使用。用上述的新工艺则可解决这个难题。

下面结合实施例对本发明作详细说明，

环氧乙烷-环氧丙烷无规共聚物的纯化方法的步骤为：

a．在60ml的环氧乙烷-环氧丙烷无规共聚物废液中加入20～40ml的醋酸丁酯，置于50～60℃水浴中，系统完全达到温度后，剧烈搅拌，使环氧乙烷-环氧丙烷无规共聚物萃取至酯相中，静置1．5～2．5小时分相；

b．取上相55ml，过滤除去不溶性杂质，55ml滤液中加入40～60ml蒸馏水，将系统温度降至1～3℃并剧烈搅拌，使环氧乙烷-环氧丙烷无规共聚物反萃至水相中，保持温度不变，静止分相；

c．取下相65ml，水浴加热至50～75℃，静止分相；

d．取下相25ml得到纯化的环氧乙烷-环氧丙烷无规共聚物。