[发明专利]人源化抗人FAS抗体

权利要求书

1、一种生产至少包括一条重链和一条轻链的人源化抗体及其衍生物的方法，该方法包括的步骤为：a  选择含有至少一个CDR的非人抗体；b  选择一人抗体重链；c  选择一人抗体轻链；d  至少将非人抗体重链中的一个CDR或其片断引入人抗体重链中以形成重组重链；和e  至少将非人抗体轻链中的一个CDR或其片断引入人抗体轻链中以形成重组轻链；其中所述对每一条人抗体轻链和重链的选择完全由它们分别同非人抗体重链和轻链的序列同源性所决定。

2、权利要求1的方法中，其中所述的CDR区在从非人抗体链向人抗体链中引入至少一个CDR或其片断之前已被从人抗体链中去除。

3、权利要求1的方法中，所述序列同源性是氨基酸序列的同源性。

4、权利要求1的方法中，对所述序列同源性的确定基本上仅同构架区有关。

5、权利要求1的方法中，对所述每一条人抗体链的选择的确定的依据是同非人抗体链在构架区至少有70％的氨基酸一致性。

6、权利要求1的方法中，所述每一条非人抗体链的CDR都被引入到相应的人抗体链中。

7、权利要求1的方法中，所述选择的非人抗体是小鼠CH11抗体。

8、权利要求1的方法中，所述选择的人轻链来自于人抗体RPMI6410’CL。

9、权利要求1的方法中，所述人重链来自于人抗体21·28’CL。

10、权利要求1的方法中，所述的从人抗体中得到的氨基酸区至少包括每个抗体构架区的大部分。

11、权利要求10的方法中，所述的从人抗体中得到的氨基酸区进一步包括恒定区，或恒定区的一部分。

12、权利要求1的方法中，将所述至少一个非人CDR区引入到人抗体时同时引入至少一个非人CDR构架区的至少一个有意义氨基酸残基。

13、一种生产至少包括一条轻链和一条重链的人源化抗体及其衍生物的方法，该方法包括的步骤为：a  选择一种至少包括一个CDR的非人抗体；b  选择人抗体重链；c  选择人抗体轻链；d  至少将非人抗体重链的一个CDR或其片断引入人抗体重链以形成重组重链；和e  至少将非人抗体轻链的一个CDR或其片断引入人抗体轻链以形成重组轻链；

其中所述对每一条人抗体重链和轻链的选择完全由它们分别同非人抗体重链和轻链的氨基酸序列同源性所确定；其中将所述至少一个非人CDR区同至少一个非人CDR构架区的至少一个有意义氨基酸残基一起引入到人抗体，将非人构架区的至少一个有意义氨基酸残基和CDR一起引入，条件是该残基至少满足下列准则之一：a)  受体的人构架区中的氨基酸很少被发现于受体的那个位置上，而供体中的相应氨基酸被普遍发现于受体的那个位置；b)  根据准则ⅰ)、ⅱ)和ⅲ)之一，推断在免疫球蛋白三维模型中，氨基酸有一个侧链原子同一抗原或一人源化抗体的CDR形成一个键；ⅰ)  侧链原子与第二原子的距离小于它们的范德华半径之和加0．5埃；ⅱ)  侧链原子是极性的且与第二个极性原子间的距离小于3．4埃；和ⅲ)  侧链原子是带电荷的且与带相反电荷原子的距离小于3．35埃；c)  发现该氨基酸所处位置涉及到确定CDR规范分类的结构；和d)  氨基酸位于重链和轻链的某一推定接触表面上。

14、权利要求13的方法，其中所述准则(b)和(d)中氨基酸的位置是由制作分子模型确定的。

15、权利要求14的方法，其中所述对氨基酸的位置鉴定还要通过与其它抗体的X-射线晶体衍射数据相比较。

16、权利要求13的方法，其中构架区的氨基酸被引入的条件是通过制作分子模型推断构架区的氨基酸同CDR相连接并且通过X-射线晶体衍射实验也常常发现该构架区的氨基酸同CDR相连接。

17、权利要求13的方法，其中所述序列的同源性的评定基本上仅与构架区有关。

18、权利要求13的方法，其中所述对每一条人抗体的选择的确定标准是抗体构架区的氨基酸至少有70％同非人抗体链的相同。

19、权利要求13的方法，其中每一条非人抗体链的全部CDR都被引入到相应的人抗体链中。