[发明专利]1.6－二磷酸果糖生物合成工艺

权利要求书

1．1,6-二磷酸果糖生物合成工艺，首先进行菌种培养，并收集菌体，其次进行合成并提纯精制，最后干燥，并形成成品。本发明的特征是，首先将根霉、犁头霉、毛霉中的任一种进行培养，收集甩干后，按1克菌体比8～12ml的发酵液，发酵20～25小时，提纯精制后即可。

2．根据权利要求，所述的合成工艺，其特征是：

(1)首先将根霉、犁头霉、毛霉中的任一筛选株于摇瓶培养6～8小时，每分钟以160～200次振荡；然后倒入敞口罐扩大培养，培养基为含糖3-4％薯干糖化液，0.3％(NH₄)₂SO₄,0.25％K₂HPO₄,pH值为5.8～6.0的混合液。6～10小时后收集菌体，用甩水机甩干；

(2)其次，取所需重量的上述菌体，然后加入按1克菌体比8～12毫升的发酵液，发酵液浓度为葡萄糖0.6～1.0mol/L,K₂HPO₄ 0.4～0.8mol/L,MgCl₂0.04～0.06mol/L,pH值为6.0～7.0；发酵20～25小时即可；

(3)接着，在上述发酵液中加入8～12％的辛醇乙醇溶液，在60～90℃条件下加热5至10分钟，停止反应；然后过滤除去蛋白，在滤液中加入2倍体积的95％乙醇，得到白色沉淀，加水溶解沉淀；然后调节pH值至8.0～9.0，除去白色沉淀；在清夜中加入50％的CaCl2乙醇溶液，产生沉淀，然后用氢型阳离子交换树脂脱钙，阴离子树脂除去无机磷盐，再用活性炭脱色，最后超滤，结晶，干燥，得到成品。

3．根据权利要求2所述的合成工艺，其特征在于，选用所述菌种，180次/min摇瓶振荡培养种子，敞口罐扩大培养(培养基：含糖3-4％薯干糖化液，0.3％(NH₄)₂SO₄,0.25％K₂HPO₄,pH5.8-6.0),8小时后收集菌体，甩水机甩干，取这样的菌体，在含10.8％葡萄糖，6.9％K₂HPO₄,0.8％MgCl₂·6H₂O,pH7.0的反应液中发酵20小时。

4．根据权利要求2所述的合成工艺，其特征在于，选用所述菌种，180次/min摇瓶振荡培养种子，敞口罐扩大培养(培养基：含糖3-4％薯干糖化液，0.3％(NH₄)₂SO₄,0.25％K₂HPO₄,pH5.8-6.0),8小时后收集菌体，甩水机甩干，取这样的菌体，在含7.9％葡萄糖，10.4％K₂HPO₄,0.8％MgCl₂·6H₂O,pH7.0的反应液中发酵20小时。

5．根据权利要求2所述的合成工艺，其特征在于，选用所述菌种，180次/min摇瓶振荡培养种子，敞口罐扩大培养(培养基：含糖3-4％薯干糖化液，0.3％(NH₄)₂SO₄,0.25％K₂HPO₄,pH5.8-6.0),8小时后收集菌体，甩水机甩干，取这样的菌体，在含10.8％葡萄糖，10.4％K₂HPO₄,0.8％MgCl₂·6H₂O,pH7.0的反应液中发酵20小时。