[发明专利]猪源抗鸡主要传染病高免血清的制备方法

说明书

本发明涉及抗鸡主要传染病高免血清的制备，特别是以异源动物-猪为载体，采用一定的免设程序与方法来制备抗鸡主要传染病如鸡新城疫、传染性法氏囊病等病毒病的高效价抗血清。

目前用疫苗进行鸡的免疫，常因各种原因导致免疫失败，因此在防治鸡的主要传染病方法中，被动免疫亦即用抗血清或卵黄抗体免疫的方法近年来被广泛应用，对挽回鸡病造成的严重经济损失起到了积极作用，但应用卵黄抗体(或鸡源抗血清)免疫，存在着严重的垂直或水平感染多种传染病的弊端。用牛、绵羊、山羊等异源动物制备抗鸡某些传染病的抗病血清(或血浆)，血清制备量少、效价低、防病品种单一。至今尚无异源动物抗鸡某些传染病的理想抗血清商品上市。

本发明的目的是为克服以上缺陷提供一种猪源抗鸡主要传染病高免血清的制备方法。

本发明的技术方案是：以异源动物—猪为制备抗鸡主要传染病抗血清动物，以穴位免疫为途径，按照一定的免疫程序，获得高效价、制备量大的高免血清。其制备方法如下：

首先选已经过抗猪病疫苗免疫的健康育肥猪，在卫生良好、专人管理的条件下饲养，对其定期进行多次特定穴位免疫，前几次均采用鸡用弱毒疫苗，剂量从首次的30羽份逐次递增至200羽份，最后一次免疫用油乳剂灭活苗，剂量为10～20羽份。免疫后15～20天，检测效价。鸡新城疫的血凝抑制(HI)效价应在1∶10240以上、传染性法氏囊病的琼扩(AGP)效价在1∶128以上、传染性支气管炎的琼扩(AGP)效价在1∶32以上为合格。

然后将检测效价合格的猪屠宰，取血、分离血清，加双抗各1000IU/ml，分装，在-18℃下保存。年内效价不变，使用时解冻血清，用生理盐水稀释。

本发明制备的高免血清可避免鸡源抗血清或卵黄抗体可能造成的垂直或水平感染，因为猪不是鸡传染病病原的自然宿主，经对猪血清检测表明，鸡的马立克氏病、病毒性关节炎、传染性支气管炎、传染性喉气管炎、鸡瘟、传染性鼻炎、鸡霍乱、EDS-76、鸡新城疫、传染性法氏囊病等10种鸡的传染病病原、抗体检测均呈阴性。由于免疫用苗均为鸡用弱毒苗及灭活苗，消除了用鸡强毒或野毒制抗血清时造成的野毒或强毒的扩散，避免了引发鸡暴发传染病的可能性。采用特定穴位免疫，疫苗用量仅是常规用量的1/5～1/10，抗血清的效价高于常规方法，可制备单价血清、多价血清。多价抗血清，效价不受影响。因猪经多次强化免疫，其血清中含高浓度的非特异性多种抗病因子，将其血清给鸡雏和成鸡注射，均无任何反应及过敏症状，效果极佳。上述免疫程序对猪体无任何不良反应，不影响其增量和肉质，每头猪可采得1000～1200ml抗血清。

下面详述制备抗鸡新城疫高免血清的实施例：

首先选用已经过抗猪病疫苗免疫的，体重60～70kg的健康育肥猪，在限定的卫生良好、专人管理的条件下饲养，对其每周进行一次后海穴位免疫(弱毒疫苗用辽阳兽医生物制药厂出售的Ⅰ系苗，油乳剂灭活苗为黑龙江兽药一厂出售)，前1～4或5次，均采用Ⅰ系苗，剂重从首次的50羽份逐次递增至100羽份，最后一次免疫采用油乳剂灭活苗，剂量为20羽份。免疫后20天，抗血清效价检测为(HI)1∶10240～20480或更高。

然后将检测效价合格的猪，进行屠宰、取血、分离血清，每头猪可采得血清1000～1200ml，加双抗后分装，在-18℃下保存。在防治鸡新城疫实验时，将血清稀释20-40倍(即HI效价为1∶512)，每只鸡肌注1ml，可收到良好效果。经过攻毒实验及田间防治试验，保护率在90％-96％。