[发明专利]纤维素结合区域

权利要求书

1．检测感兴趣之物质的诊断试剂盒，其包含：

(a)纤维素结合区域(CBD)融合产物，其中包括(ⅰ)CBD，

其氨基酸序列由图1A-1B的氨基酸序列组成的，或由ATCC登

记号为No.75444的载体编码，并且能够以高亲和力与纤维素结合，

并基本上不含与之自然结合的其他蛋白质；和(ⅱ)能够结合感

兴趣之物质的第二种蛋白质；

(b)可检测的标记；和

(c)纤维素。

2．根据权利要求1的诊断试剂盒，其中所说的纤维素由壳多糖所替代。

3．根据权利要求1或2的诊断试剂盒，其中所说的第二种蛋白质是蛋白A或酶。

4．根据权利要求1或2的诊断试剂盒，其中所说的第二种蛋白质是HSP蛋白质、HSP抗体、HSP相关蛋白质、肽或其抗原部分。

5．根据权利要求1或2的诊断试剂盒，其中所说的纤维素结合区域融合产物进一步包括与所说的第二种蛋白质亲和结合的配体，所说的配体能够结合所说的感兴趣的物质。

6．根据权利要求5的诊断试剂盒，其中所说的配体是抗体。

7．检测试验样品中感兴趣物质的存在的方法，该方法包括：

(a)在允许所说的感兴趣的物质与所说纤维素结合区域(CBD)

融合产物的第二种蛋白质结合的条件下，将可能含有感兴趣之物质

的试验样品与足够量的CBD融合产物一起保温，该融合产物包含

(ⅰ)纤维素结合区域，其氨基酸序列与图1A-1B的氨基酸序

列，或者与由ATCC登记号为75444的载体表达的CBD有至少80％

的序列相似性，并且能够以高亲和力与纤维素或壳多糖结合，并且

基本上不含与之自然结合的其他蛋白质，及(ⅱ)能够与所说的

感兴趣的物质结合的第二种蛋白质；

(b)将试验样品和纤维素结合区域融合产物与一定量的纤维素或

壳多糖接触，使其可有效地结合于步骤(a)中使用的一定量的所说CBD融合产物上，以提供不溶性纤维素-纤维素或壳多糖-纤维素结合区域融合产物的结合复合物；

(c)从末被结合的成分中分离所说的不溶性纤维素-纤维素或壳多糖-纤维素结合区域融合产物的结合复合物；

(d)将所说的不溶性纤维素-纤维素或壳多糖-纤维素结合区域融合产物的结合复合物与足量的可检测的标记一起保温，所说的标记能够结合所说的感兴趣的物质；以及

(e)从末被结合的成分中分离步骤(d)所说的不溶性纤维素-纤维素或壳多糖-纤维素结合区域融合产物的结合复合物，并测定所说的标记存在与否，以提供所说的试验样品中是否存在所说的感兴趣物质的指征。

8．检测试验样品中感兴趣的物质的存在的方法，该方法包括：

(a)使可能含有感兴趣的物质的试验样品与能够固定所说的感兴趣的物质的不溶性基质接触；

(b)在允许将所说的固相化的感兴趣的物质与所说纤维素结合区域(CBD)融合产物的所说第二种蛋白质结合的条件下，使所说的不溶性基质与足量的CBD融合产物一起保温，其中所说的融合产物包含(ⅰ)纤维素结合区域，其氨基酸序列与图1A-1B的氨基酸序列，或者ATCC登记号为No.75444的载体表达的CBD有至少80％的序列相似性，并且能够以高亲和力与纤维素或壳多糖结合，并且基本上不含与之自然结合的其他蛋白质，和(ⅱ)能够结合所说的固定化的感兴趣的物质的第二种蛋白质；

(c)从末被结合的成分中分离所说的步骤(b)的不溶性基质；

(d)在允许将所说的标记与所说感兴趣的物质或所说CBD融合产物或纤维素或壳多糖结合的条件下，将所说的步骤(c)的不溶性基质与能够结合所说的感兴趣的物质，所说的CBD融合产物或纤维素或壳多糖的可检测标记一起保温；以及

(e)从末被结合成分中分离所说的步骤(d)的不溶性基质并测定是否存在所说的标记，以提供所说试验样品中是否存在所说感兴趣的物质的指征。