[发明专利]纤维素结合区域无效
申请号: | 98118445.6 | 申请日: | 1994-04-14 |
公开(公告)号: | CN1217339A | 公开(公告)日: | 1999-05-26 |
发明(设计)人: | O·索塞耶夫;I·施皮尔;R·H·多伊;M·A·戈斯坦 | 申请(专利权)人: | 加州大学评议会;耶路撒冷希伯来大学伊森姆研究发展公司 |
主分类号: | C07K14/00 | 分类号: | C07K14/00;C07H17/00;C12P21/06 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人: | 齐曾度 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 纤维素 结合 区域 | ||
1.一种纤维素结合区域融合蛋白,它包含纤维素结合区域(CBD)和第二蛋白,所述纤维素结合区域的氨基酸序列是由图1A-1B所示的氨基酸序列组成的。
2.一种纤维素结合区域融合蛋白,它包含纤维素结合区域(CBD)和第二蛋白,所述纤维素结合区域的氨基酸序列由ATCC登记号为No.75444载体表达的CBD氨基酸序列组成。
3.一种纤维素结合区域融合蛋白,它包含纤维素结合区域和第二蛋白,所述纤维素结合区域的氨基酸序列与图1A-1B的氨基酸序列有至少80%的序列相似性,并且该纤维素结合区域能够以高亲和力与纤维素或壳多糖结合,基本上不含与之自然结合的其他蛋白。
4.一种纤维素结合区域(CBD)融合蛋白,它包含纤维素结合区域和第二蛋白,所述纤维素结合区域的氨基酸序列与具有ATCC登记号No.75444的载体表达的氨基酸序列有80%的序列相似性,并且该纤维素结合区域能够以高亲和力与纤维素或壳多糖结合,基本上不含与之自然结合的其他蛋白。
5.根据权利要求1、2、3或4的纤维素结合区域融合蛋白,其中第二蛋白是蛋白A、肝素酶、能够降解环境污染物的酶、HSP蛋白、HSP抗体、交叉反应性HSP相关蛋白或肽,或其抗原部分。
6.根据权利要求1、2、3或4的纤维素结合区域融合蛋白,其中所说的第二蛋白是重组抗体。
7.根据权利要求6的纤维素结合区域融合蛋白,其包含纤维素结合区域-VL-VH。
8.根据要求权利要求1、2、3或4的纤维素结合区域融合蛋白,其中所说的第二蛋白是激素。
9.根据权利要求1、2、3或4的纤维素结合区域融合蛋白,其中所说的第二蛋白是酶。
10.根据权利要求1、2、3或4的纤维素结合区域融合蛋白,其中所说的第二蛋白选自蛋白A、蛋白G、链霉抗生物素蛋白、抗生物素蛋白、Taq聚合酶、非Taq聚合酶、碱性磷酸酶、核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶、限制性酶、过氧化物酶、葡聚糖酶、壳多糖酶、β和α-葡糖苷酶、β和α-glucoronidase、淀粉酶、转移酶、β-内酰胺酶、非β-内酰胺酶抗生素修饰和降解酶、荧光素酶、酯酶、脂酶、蛋白酶、细菌素、抗生素、酶抑制剂、生长因子、激素、受体、膜蛋白、核蛋白、转录和转译因子及核酸修饰酶。
11.以登记号75443保藏于ATCC的质粒pCBD-ProtA1。
12.包含编码权利要求1、2、3或4的纤维素结合区域融合蛋白的核苷酸序列的重组载体。
13.以登记号No.69283保藏于ATCC的重组大肠杆菌pCBD-ProtAl/2097。
14.生产纤维素结合区域(CBD)融合产物的方法,该方法包括:
(a)提供编码CBD融合产物的核酸,所说的CBD融合产物包含CBD和第二蛋白,所述CBD的氨基酸序列由图1A-1B的氨基酸序列组成,所说的CBD能够以高亲和力结合纤维素或壳多糖,并且基本上不含与之自然结合的其他蛋白,并且所说的第二蛋白包含N末端和C末端;
(b)用所说的核酸转染宿主细胞;以及
(c)在适于表达所说的CBD融合产物的条件下培养被转化的宿主细胞。
15.根据权利要求14的方法,其中所说的核酸还编码所说纤维素结合区域融合产物中第二蛋白的N末端氨基酸上游的裂解位点。
16.根据权利要求14的方法,其中所说的核酸还编码所说纤维素结合区域融合产物中第二蛋白的C末端氨基酸下游的裂解位点。
17.根据权利要求14的方法,其中所说的核酸还编码所说纤维素结合区域融合产物中第二蛋白的N末端氨基酸上游的第一裂解位点,和所说纤维素结合区域融合产物中第二蛋白的C末端氨基酸下游的第二裂解位点。
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