[发明专利]10－羟基－△2－癸烯酸的提取及应用

说明书

本发明属于10-羟基-Δ2-癸烯酸的提取，具体涉及10-羟基-Δ2-癸烯酸的物理提取方法及其应用。

蜂王浆具有免疫调节，抗菌，抗炎，抗癌等作用在国际国内已被公认，科学实验证明蜂王浆中起主要作用的物质是10-羟基-Δ2-癸烯酸，通用代号为10-HDA。以下用10-HDA因此如何获取高纯度的10-HDA和对其的利用，一直是世界各国科学工作者研究探索的问题。通过武汉市医学信息中心的查新检索：与10-HDA提取密切相关的文献有3篇，其中有“在XE-60柱上分离及测定蜂王浆中10-羟基-Δ2癸烯酸”、“(E)-10-羟基-2癸烯酸分离鉴定及其抗辐射作用”、“10-羟基-2-癸烯酸含量测定方法评价”。外文未见相同报道；中方所检文献有与提交课题所述的提取蜂王浆中10-HDA的相似报道，但未见蜂王浆保持研究及将10-HAD提纯后加入其它中药配制成复方制剂的相同报道。

在所检与10-HDA提取有关的文献中，其公开了的提取方法的是化学方法。但此方法提取的10-HDA的稳定性尚待探索，它只适用于实验室使用。如何使10-HDA形成产品得以充分利用尚未有文献公开。也未有文献公开10-HDA的物理提出方法。

本发明的目的在于提供一种用物理方法从蜂王浆中提取10-羟基-Δ2-癸烯酸的方法。本发明的另一个目的是应用10-羟基-Δ2-癸烯酸与中药配伍制成复方制剂。

为实现本发明的第一个目的，对蜂王浆进行以下处理：(1)蜂王浆的消毒处理，杀死其中的耐酸菌；(2)在保温条件下，使蜂王浆中的10-HDA充分结晶；(3)将蜂王浆中结晶的10-HDA分离出，然后进行纯化，乳化处理；(4)利用冷冻真空干燥设备进行干燥处理，得到10-HDA原粉。

国内外专家学者都认为10-HDA具有多功能锡免疫调节作用，有较强的抗癌抑制细胞生长，扩散的作用。具有抑菌和杀菌作用，具有抗炎作用。以此方法提取的10-HDA不受化学漂剂的污染，保持它的纯天然性。但单独服用后，容易产生便秘的副作用。所以须与其它物质配伍使用。以此方法提取的10-HDA稳定性好，可长期保存。

为实现本发明的另一个目的，提出对10-HDA的应用是与中药配伍制成复方制剂，其中中药的重量比为0.012～0.09∶4。中药由当归、黄芪和天花组成，其重量比为0.6∶2.4∶1。

选用的当归有补血，调经、活血止痛、润肠通便的功效(中药学)。德国研究人员研究指出当归中AR-1具有重要抗肿瘤作用。AR-1用量在1.6-100mg/kg时可有效抗S-180腹水瘤，IMC癌并发现当归热水提取物尚有诱导干抗素产生活性(抗癌中药大辞典)。

黄芪的药理作用在于补气升阳，固表止汗，托疮生肌，利水消肿。黄芪有增加要体免疫功能，促进抗体生成，还能保护肝脏，增加血细胞，提高肿瘤细胞内环磷酸甘的含量能抑制肿瘤细胞产生，甚至使肿瘤细胞逆转，对一些致癌性病毒的入侵和复制亦显示出阻碍作用，亦可能发挥抗肿瘤作用(抗癌中药大辞典)。

天花粉的药理作用在于利小便，消於血、轻身益气等作用。

选用当归、黄芪、天花粉等中药有效地克服了用10-HDA后产生的便秘的副作用，同时强化了10-HDA的作用。

对当归、黄花、天花粉的处理可采用精洗浸泡、在生物发酵设备中进行104℃煮沸保持30分钟，60℃保持90分钟，40℃保持6小时以后来菌软化，用胶体磨进行乳化处理、提取药汁、过滤去渣、浓缩成乳剂、冷冻干燥、粉碎、分装等工艺。

图1 10-HDA的提出工艺图。

图2中药处理工艺图。

图3沙门氏菌试验流程图。

图4霉菌总数测定程序图。

实施例：

1、10-HDA的提取

(1)采用60钴消毒工艺将蜂王浆中的耐酸菌杀死。

(2)在温度25～35℃的条件下、保持48小时，使蜂王浆中的10-HDA充分结晶。

(3)以100目过滤结晶物后，漂洗并高速离心纯化结晶物，再用胶体磨进行乳化处理。

(4)在-40℃条件下对乳化物进行冷冻后升温至35℃干燥处理；冷冻干燥全过程为18小时对干燥物进行粉碎，以每粒70mg含量分装入胶囊中。

2、与中药配伍和复方制剂

为克服10-HDA的副作用，以10-HDA70mg与4g中药配伍混合制成复方制剂，中药由当归0.6克，黄芪2.4克，天花粉1克组成。中药按前述如图2工艺处理。

按以上方法得到的10-HDA的复方制剂的技术要求及检测如下：