[发明专利]一种新的人蛋白质及其编码序列,及制法和用途

说明书

本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种新的人蛋白质及其核苷酸编码序列。更具体地说，本发明涉及人ARL5的cDNA序列，该蛋白是鼠ARL5的同系物。本发明还涉及由该核苷酸序列编码的多肽，这些多核苷酸和多肽的应用，以及所述多核苷酸和所述多肽的生产方法。

ADP核糖基化因子(ADP ribosylation factor，简称为“ARF”)是分子量为20KD左右的鸟嘌呤核苷酸结合蛋白(Trends Biochem.Sci.1995，20，147-150；Cell.Signal.1992.4.367-399；Prog.Nucleic Acid Res.Mol.Biol.1993，45，47-65；Nature1994，372，704-708)。哺乳动物的ARF家族至少有六个成员，即ARF1至ARF6，而在酵母中则至少已发现了三个成员。另外ARF家族还包括了一些与ARF高度同源，但缺乏霍乱毒素辅助因子活性的蛋白；此外，与ARF不同的是，这些蛋白在与GTP结合时依赖于镁离子与磷脂，因此这些蛋白被统称为ARL蛋白(ARF样蛋白，ARF-like protein)。另外，ARF蛋白的氨基端能被肉豆蔻酰基化，ARF豆蔻醇化被认为有利于ARF作用，而在ARL中则没有发现这一特点。

哺乳动物中的ARF高度保守，广谱表达于各组织。根据氨基酸顺序、大小和基因结构可分为三类：一，ARF1-3；二，ARF4和ARF5；三，ARF6。ARF家族的成员通常被归入RAS超家族(Biochemestry，1991，30，4637-4648)，然而它们一般与RAS家族其它成员仅有轻微的同源性，并且与其它Ras家族成员不同的是，它们的羧基端缺少半胱氨酸残基，从而无法成为异戊二烯化的底物。

ARF1最初被发现时，是作为一种对霍乱毒素的ADP核糖基转移酶的活性有协同作用的激活剂，并因此而得名。Kahn，R，A和Gilman，A，G分别于1984年和1986年从兔肝脏和牛脑膜中提取出ARF因子(J.Biol.Chem1984，259，6228-6234 J.Biol.Chem 1986，261，7906-7911)。1987年和1988年，Tsai等又从牛脑中提取出一种膜ARF(mARF)和两种可溶性ARF(sARF1，2)(Proc.Natl.Acad.Sci U.S.A.1987，84，5139-5142 J.B.C.1988，263，1768-1772)。此后科学家相继通过杂交进行ARF cDNA克隆，并用寡核苷酸作为探针，发现了不同动物的不同ARF。1988年，Sewell，J，L等从牛肾上腺中克隆bARF1(bovineARF1)，并从酵母基因库中克隆到了yARF2(yeast ARF2)(Pro.Natl.Acad.Sci.USA1988，85，4620-4624)。同年，Price等在牛视网膜中克隆得到bARF2(Proc.Natl.Acad.Sci.USA，1988，85，5488-5491)。1989年，Peng，Z，Calver等得到了 hARF(human ARF1)(Biofactor 1989，2，45-49)。同时，Bobak等也从人脑库中获得了hARF1和另一个因子hARF3(Proc.Natl.Acad.Sci.USA，1989，86，6101-6105)。1990年，Stearn，T等得到了yARF1(Mol.Cell.Biol，1994，138(1-2)，157-166)。1991年，Kahn，R，A等克隆得到hARF4(J.Biol.Chem.1991，266，2606-2614)。同年，Price，Tsai等得到了家族中最后两个因子ARF5，6(J.Biol.Chem.1991，266，2772-2777)。