[发明专利]获得雄性不育植物的分子方法

权利要求书

1.获得雄性不育植物的分子方法，该方法包括：

用第一个重组DNA序列和第二个重组DNA序列稳定地转化或再转化或共转化植物细胞，其中所说的第一个重组DNA序列包含连接到第一个花药特异性启动子后的编码植物雄性器官或组织细胞致死性蛋白质的核苷酸序列，所说的第一个花药特异性启动子和编码植物雄性器官或组织细胞致死性蛋白质的核苷酸序列之间插入了一段两侧翼接有特异性识别和剪切序列的阻断序列；其中所说的第二个重组DNA序列包含编码识别阻断序列两侧翼的特异性识别和剪切序列的蛋白质的第二个核苷酸序列，并且所说的第二个核苷酸序列被连接到第二个特异性启动子之后；并由所说植物细胞再生得到完整的植株。

2.根据权利要求1的方法，其中所说的第一个花药特异性启动子是花药绒毡层细胞特异性启动子序列，并且第二个特异性启动子是花药小孢子特异性启动子序列。

3.根据权利要求2的方法，其中所说花药绒毡层细胞特异性启动子包括但不仅限于osg6B启动子序列和TA29启动子序列，并且其中所说的花药小孢子特异性启动子包括但不仅限于ntm19启动子序列。

4.根据权利要求1的方法，其中所说的第一个花药特异性启动子是花药绒毡层细胞特异性启动子序列，并且第二个特异性启动子是组成型启动子序列。

5.根据权利要求4的方法，其中所说花药绒毡层细胞特异性启动子包括但不仅限于osg6B启动子序列和TA29启动子序列，并且其中所说的组成型启动子序列包括但不仅限于35S启动子序列。

6.根据权利要求1的方法，其中所说的第一个花药特异性启动子是花药绒毡层细胞特异性启动子序列，并且第二个特异性启动子也是花药绒毡层细胞特异性启动子序列。

7.根据权利要求6的方法，其中所说的第一个和第二个花药绒毡层细胞特异性启动子包括但不仅限于osg6B启动子序列和TA29启动子序列。

8.根据权利要求1的方法，其中所说的第一个花药特异性启动子是花药绒毡层细胞特异性启动子序列，并且第二个特异性启动子是诱导型启动子序列。

9.根据权利要求8的方法，其中所说花药绒毡层细胞特异性启动子包括但不仅限于osg6B启动子序列和TA29启动子序列，并且其中所说的诱导型启动子序列包括但不仅限于MT启动子序列。

10.根据权利要求1的方法，其中所说的第一个重组DNA序列中的编码植物雄性器官或组织细胞致死性蛋白质的核苷酸序列是编码芽孢杆菌RNA酶barnase的核苷酸序列，并且编码第二个重组DNA序列中识别连接在第一个重组DNA序列中的所说的阻断序列两侧翼的特异性识别和剪切序列的蛋白质的第二个核苷酸序列是编码重组酶的核苷酸序列。

11.根据权利要求1的方法，其中所说的的阻断序列是可在植物特定细胞发育阶段被所说的细胞特异性启动子驱动表达的重组酶基因产物剪切，从而使所说的雄性器官细胞致死基因得以表达的核苷酸序列，并且所说的序列是非特定DNA序列编码区或非特定转录单位或编码polyA的核苷酸序列。

12.根据权利要求1的方法，其中所说的植物细胞或植株是F₀、F₁或F₂代植物细胞或植株。

13.根据权利要求1的方法，其中所说的被转化的植物细胞或植株是某个植物种的被第一个和第二个重组DNA序列再转化或共转化的同一个植物细胞或植株。并且所说的具有雄性不育性状的植物是由所说的植株直接得到的。

14.根据权利要求1的方法，其中所说的被转化的植物细胞或植株是某个植物种的被第一个和第二个重组DNA序列再转化或共转化的同一个植物细胞或植株。并且所说的具有雄性不育性状的植物是由所说的植株自交后再生得到的。

15.根据权利要求1的方法，其中所说的被转化的植物细胞或植株是某个植物种的被第一个和第二个重组DNA序列再转化或共转化的同一个植物细胞或植株。并且所说的具有雄性不育性状的植物是由这一细胞或植株本身或自交后代被施加诱导物后得到的。