[发明专利]哺乳动物CHK1效应物细胞周期关卡蛋白激酶材料与方法

权利要求书

1.一种纯化和分离的编码人Chk1激酶的多核苷酸，该激酶的氨基酸序列陈述于SEQ ID NO.：2。

2.一种纯化和分离的编码小鼠Chk1激酶的多核苷酸，该激酶的氨基酸序列陈述于SEQ ID NO.：4。

3.权利要求1或2的多核苷酸，是一种DNA。

4.权利要求3的DNA，是一种cDNA。

5.权利要求3的DNA，是基因组DNA。

6.权利要求3的DNA，是一种全部或部分化学合成的DNA。

7.一种人Chk1 DNA，包含SEQ ID NO.：1所列出的DNA序列。

8.一种小鼠Chk1 DNA，包含SEQ ID NO.：3所列出的DNA序列。

9.权利要求3的DNA的RNA转录物。

10.一种DNA，编码全长的哺乳动物Chk1激酶，选自以下：

  (a)一种DNA，在严格条件下与SEQ ID NO.：2 DNA的非编码链杂交；以及

  (b)一种DNA，在严格条件下与SEQ ID NO.：4 DNA的非编码链杂交。

11.一种包含权利要求1，2，3或10的DNA的载体。

12.权利要求11的载体，其中所述DNA与一个表达控制DNA序列可操纵地连接。

13.一种宿主细胞，用权利要求1，2，3或10的DNA稳定地转化或转染，其转化或转染方式可使Chk1激酶在该宿主细胞中表达。

14.生产Chk1激酶的方法，该方法包括在适宜的营养培养基中生长权利要求11的宿主细胞及分离Chk1激酶。

15.一种纯化和分离的多肽，包含由SEQ ID NO.：2组成的人Chk1激酶氨基酸序列。

16.一种纯化和分离的多肽，包含由SEQ ID NO.：4组成的小鼠Chk1激酶氨基酸序列。

17.一种多肽或肽，能与哺乳动物Chk1激酶特异地结合。

18.权利要求17的多肽，是一种抗体。

19.权利要求18的抗体，是一种单克隆抗体。

20.一种生产权利要求19的单克隆抗体的杂交瘤细胞系。

21.一种鉴定化合物为哺乳动物Chk1激酶调节剂的方法，包括以下步骤：

   a)在存在和不存在该化合物的情况下测定Chk1激酶活力；

   b)比较步骤(a)中的激酶活力；以及

   c)根据在存在和不存在该化合物的情况下观察到的Chk1激酶活力的差别鉴定该化合物为调节剂。

22.一种鉴定能抑制哺乳动物Chk1的化合物的方法，包括以下步骤：

   a)在遗传变化细胞中表达哺乳动物Chk1，因而降低细胞对DNA损伤的敏感性，该敏感性是与基因变化有关联的；

   b)在待测试的调节剂化合物存在和不存在的情况下，将步骤(a)的遗传变化细胞暴露于DNA损伤处理；

   c)测量细胞对DNA损伤的敏感性；以及

   d)将一种恢复细胞对DNA损伤的敏感性的化合物鉴定为Chk1活力的抑制剂。