[发明专利]经修饰的TNFα分子和编码该TNFα分子的DNA以及含有该TNFα分子和该DNA的疫苗

权利要求书

1.一种经修饰的人TNFα分子，将所述经修饰的TNFα分子接种人类宿主后，能诱发针对野生型人TNFα的中和抗体，此分子中人TNFα分子的至少一个肽片段被至少一个已知含有免疫显性T细胞抗原决定部位的肽或含有免疫显性抗原决定部位和包含至少一个TNFαB细胞抗原决定部位的人TNFα分子的一或两侧外侧区域的所述分子的截断形式所取代，其中取代作用造成前β-折叠、任一连接环和/或后β-折叠的B’、I或D股的任一股氨基酸序列的实质改变。

2.一种经修饰的人TNFα分子，将所述经修饰的TNFα分子接种人类宿主后，能诱发针对野生型人TNFα的中和抗体，此分子中人TNFα分子的的至少一个肽片段被至少一个已知含有免疫显性T细胞抗原决定部位的肽或含有免疫显性抗原决定部位和包含至少一个TNFαB细胞抗原决定部位的人TNFα分子的一或两侧外侧区域的所述分子的截断形式所取代，其中所述经修饰的TNFα分子基本上无TNFα活性。

3.根据权利要求2所述的经修饰的人TNFα分子，其中所述经修饰人TNFα分子以L929生物分析法测试时是基本上无TNFα活性，且其中在适当宿主体内诱发的针对该经修饰的人TNFα的抗体明显抑制L929生物测定中野生型TNFα的活性和/或该抗体明显抑制野生型TNFα与55kD TNFα受体1(TNFα-R55)或75kD TNFα受体(TNFα-R75)的结合。

4.一种经修饰的人TNFα分子，将此经修饰TNFα分子接种人类宿主后，能诱发针对野生型人TNFα的中和抗体，此分子中人TNFα分子的至少一个肽片段被至少一个已知含有免疫显性T细胞抗原决定部位的肽或含有免疫显性抗原决定部位和包含至少一个TNFαB细胞抗原决定部位的人TNFα分子的一或两侧外侧区域的所述分子的截断形式所取代，其中该取代作用可在TNFα分子区域内完成以基本上保留B股与G股的β-折叠结构。

5.根据权利要求1-4中任意一项所述的经修饰的人TNFα分子，其中取代作用在涉及前β-折叠的任一股和/或连接环的TNFα分子区域内完成以基本上保留后β-折叠任一股的β-折叠结构。

6.根据权利要求1-4中任意一项所述的经修饰的人TNFα分子，其中取代作用在涉及后β-折叠D股片段的TNFα分子区域内完成。

7.根据权利要求1-4中任意一项所述的经修饰的人TNFα分子，其中取代作用包含前β-折叠H股的至少一个片段和与I股连接环的至少一个片段，优选地是第132至146位氨基酸。

8.根据权利要求1-4中任意一项所述的经修饰的人TNFα分子，其中取代作用包含H股和I股及完整连接环片段，优选地是第132至152位氨基酸。

9.根据权利要求1-4中任意一项所述的经修饰的人TNFα分子，其中取代作用包含D股片段、E股至少一个片段和完整连接环，优选地是第65至79位或第64至84位氨基酸。

10.根据权利要求1-4中任意一项所述的经修饰的人TNFα分子，其中取代作用包含完整C’和C股及D股片段，优选地是第40至60位氨基酸。

11.根据权利要求1-4中任意一项所述的经修饰的人TNFα分子，其中取代作用包含E股的至少一个片段和一个或两个连接环的前β-折叠的至少一个片段，优选地是第76至90位氨基酸。

12.根据权利要求1-4中任意一项所述的经修饰的TNFα分子，具有SEQ ID NO.8中所示的氨基酸序列。

13.根据权利要求1-4中任意一项所述的经修饰的TNFα分子，具有SEQ ID NO.10中所示的氨基酸序列。

14.根据权利要求1-4中任意一项所述的经修饰的TNFα分子，具有SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.16所示的氨基酸序列。

15.根据权利要求1-4中任意一项所述的经修饰的TNFα分子，具有SEQ ID NO.20中所示的氨基酸序列。

16.根据权利要求1-4中任意一项所述的经修饰的TNFα分子，具有SEQ ID NO.14中所示的氨基酸序列。