[发明专利]诊断和预防莱姆病用的组合物的表面抗原和蛋白质

说明书

本发明得到国立卫生研究院补助金No.ROI AI35027和RR/AE00164-32的部分资助。美国政府享有本发明的一些权利。

发明领域

本发明总地涉及用于诊断、治疗和预防莱姆疏螺旋体病(Lyme borreliosis)的药物和诊断组合物领域。更具体地说，本发明提供了用于诊断、治疗或预防莱姆病的分离的疏螺旋体天然表面抗原及其抗体。

发明背景

Borrelia burgdorferi(广义)是一个类属术语，它包括几个与莱姆疏螺旋体病(莱姆病)有关且认为是主要病因的疏螺旋体种属：B.burgdorferi(狭义的)、B.garinii、和B.afezlii。该疾病通过携带螺旋体的各种硬蜱属(Ixodes)蜱的叮咬而传播。在美国，感染的主要宿主是白腿小鼠(Peromyscus leucopus)，感染可传播给许多哺乳动物，包括狗、猫和人[J.G.Donahue等人，Am.J.Trop.Med.Hyg.，36：92-96(1987)；R.T.Green等人，J.Clin.Micro.，26：648-654(1988)]。尽管患者体内存在主动性免疫应答，但是该疾病仍在患者体内持续多年。推测这种持续存在(至少部分)是细菌蛋白抗原性变异的结果[J.R.Zhang等人，Cell，89：275-285(1997)]。

由于缺少能迅速准确测试的权威性血清学方法，诊断人和动物体内莱姆病存在困难。目前的诊断试验的缺点是灵敏度和特异性低，正如威斯康星州卫生实验室最近公布的实验室诊断调查中所描述的那样[L.Bakken等人，J.Clin.Microbiol.35：537(1997)]。本领域需要早期检测莱姆病的简单、灵敏和特异的诊断组合物和方法。

关于Borrelia burgdorferi蛋白和多肽的出版物提议，它们可用作诊断或药物制剂。这些蛋白和多肽包括外表面蛋白A和B(OspA和OspB)、鞭毛蛋白和根据估计分子量命名的其它蛋白P212、P39、P66和P83[A.G.Barbour等人，Infect.Immun.，45：94-100(1984)；W.J.Simpson等人，J.Clin.Microbiol.，28：1329-1337(1990)；K.Hansen等人，Infect.Immun.，56：2047-2053(1988)；K.Hansen等人，Infect.J.Clin.Microbiol.，26：338-346(1988)；B.Wilske等人，Zentral，Bakteriol Parasitenkd.Infektionshkr.Hyg.Abt.1 Orig.Reihe.A.，263：92-102(1986)；D.W.Dorward等人，J.Clin.Microbiol.，29：1162-1170(1991)；公开的NTIS美国专利申请号485,551；欧洲专利申请No.465,204，1992年1月8日公开；国际专利申请No.PCT/US91/01500，1991年9月19日公开；国际专利申请No.PCT/EP90/02282，1991年7月11日；国际专利申请No.PCT/DK89/00248，1990年5月3日公开；国际专利申请No.WO92/00055，1992年1月9日公开]。

一种用作疫苗的较佳的蛋白候选物是OspA[M.Philipp等人，J.Spirochetal andTich-bome Diseases，3：67-79(1996)]。在食血时，螺旋体在蜱中肠到唾液腺的途径中，OspA的表达停止或下调[A.DeSilva等人，J.Exp.Med.，183：271-275(1996)]。该现象可能会产生OspA疫苗效率降低的潜在问题。螺旋体损耗(attrition)可能只发生在蜱中肠内[A.DeSilva等人，上文所述]，而不发生在脊椎动物宿主感染时。由于肩突硬蜱(Ixodes scapularis)的唾液含有去补体因子[T.Mather等人，＂硬蜱属唾液：Borreliaburgdorferi的感受态载体和可能的疫苗策略＂，莱姆病第VII次国际议会，San Francisco，CA(1996)]，蜱中肠中螺旋体损耗可能通过仅有抗体参与而补体不参与的机制发生。