[发明专利]从米曲霉中克隆脯氨酰二肽基肽酶

权利要求书

1.一种来自米曲霉的重组脯氨酰二肽基肽酶(DPP IV)包括SEQID NO：2 1-755氨基酸的氨基酸序列或其功能性衍生物。

2.权利要求1的重组脯氨酰二肽基肽酶，该酶与一导肽相融合。

3.权利要求2的脯氨酰二肽基肽酶，该酶与具有SEQ ID NO：2-16～-1位氨基酸序列的米曲霉导肽相融合或其功能性衍生物。

4.米曲霉导肽含有SEQ ID NO：2 -16～-1位的氨基酸序列或其功能性衍生物。

5.一种DNA分子，包括编码根据权利要求1的酶的dppIV基因。

6.一种根据权利要求5的DNA分子，它是包括dppIV基因的载体。

7.一种根据权利要求5的DNA分子，其中dppIV基因可操作地与至少一个指导基因表达的调节序列相连。

8.一种根据权利要求7的DNA分子，其中调节序列衍生自非dppIV基因来源的生物体。

9.一种根据权利要求5的DNA分子，其中dppIV基因包括SEQID NO：1核苷酸序列的编码部分或其因遗传密码简并性产生的功能性衍生物。

10.一种通过重组技术表达根据权利要求1-4的酶的细胞。

11.一种根据权利要求10的细胞，它为巴斯德毕赤氏酵母CNCM I-1886。

12.一种根据权利要求10的细胞，它可过量表达所述的酶。

13.一种根据权利要求12的细胞，它为一种在含1％(w/v)小麦谷蛋白的基本培养基中生长时，每毫升上清能提供至少50mU脯氨酰二肽基肽酶活性的米曲霉。

14.一种根据权利要求12的米曲霉，它与根据权利要求5到9的多个重组功能性dppIV基因结合。

15.一种根据权利要求14的米曲霉，它为米曲霉CNCM I-1888。

16.一种天然提供脯氨酰二肽基肽酶活性的曲霉，它与天然指导编码脯氨酰二肽基肽酶活性的基因表达的曲霉天然启动子的多拷贝结合。

17.一种根据权利要求16的曲霉，它与包括在核苷酸序列SEQ IDNO：1中的启动子的多拷贝结合。

18.根据权利要求17的曲霉，它与具有SEQ ID NO：1的核苷酸1836到核苷酸1966的编码核苷酸序列的启动子的多拷贝结合。

19.一种根据权利要求18的米曲霉，它为米曲霉CNCM I-1887。

20.一种天然提供脯氨酰二肽基肽酶活性的曲霉，它被遗传操纵从而使dppIV基因失活。

21.一种生产根据权利要求1所述的酶的方法，包括在细胞表达酶的条件下，在适当生长培养基中培养根据权利要求10-19的重组细胞，并任选以浓缩物形式选择分离所述的酶。

22.根据权利要求1的蛋白或根据权利要求10-19的细胞水解含蛋白物质的用途。

23.提供脯氨酰二肽基肽酶活性的酶和/或微生物，与至少一种提供脯氨酰氨基酸二肽酶活性的酶共用在水解含蛋白物质中的用途。

24.一种食物产品，包括通过用至少一种微生物酵解含蛋白物质获得的蛋白水解产物，所述的微生物当其在含1％(w/v)小麦谷蛋白的基本培养基中生长时，提供超过50mU/ml的脯氨酰二肽基肽酶活性。