[发明专利]在其乳中生产寡糖的转基因哺乳动物

权利要求书

1.产生其体细胞和生殖细胞含有至少一种转基因的非人类转基因哺乳动物的方法，其中所述至少一种转基因的表达导致在该哺乳动物乳中产生寡糖和糖蛋白，该方法包括以下步骤：

(a)制备至少一种转基因，所述至少一种转基因包含以可操作连接的1)至少一种在泌乳细胞中有功能的表达调节序列，2)编码在泌乳细胞中有功能的信号序列的DNA序列，和3)编码酶的DNA序列；

(b)将所述至少一种转基因引入非人类哺乳动物胚中，并将所得的胚转移入雌性受体中；

(c)鉴别至少一个雌性后代，其中所述至少一种转基因的表达导致产生至少一种酶，这种酶然后催化该哺乳动物乳中产生寡糖和糖蛋白。

2.权利要求1的方法，其中所述非人类转基因哺乳动物选自小鼠、大鼠、兔子、猪、山羊、绵羊和乳牛。

3.权利要求1的方法，其中所述至少一种酶为糖基转移酶。

4.权利要求3的方法，其中所述糖基转移酶选自：岩藻糖基转移酶、半乳糖基转移酶、乙酰基转移酶、glucoronyl转移酶、葡糖酸差向异构酶(gluconylepimerase)、唾液酸转移酶、甘露糖基转移酶、磺基转移酶、β-乙酰半乳糖胺转移酶和N-乙酰葡糖胺转移酶。

5.权利要求1的方法，其中所述寡糖选自：半乳糖α1-3半乳糖β1-4葡萄糖、2’岩藻糖乳糖、3’岩藻糖乳糖、乳糖-N-新四糖、乳糖-N-四糖、乳糖-N-岩藻五糖、乳糖-N-岩藻五糖的唾液酸化衍生物、乳糖-N-岩藻五糖II、乳糖-N-岩藻五糖II的唾液酸化衍生物、乳糖-N-岩藻五糖III、乳糖-N-岩藻五糖III的唾液酸化衍生物、乳糖-N-岩藻五糖IV、乳糖-N-岩藻五糖IV的唾液酸化衍生物、乳糖-N-岩藻五糖V、乳糖-N-岩藻五糖V的唾液酸化衍生物、乳糖-N-二岩藻五糖I、乳糖-N-二岩藻五糖的唾液酸化衍生物、乳糖-N-二岩藻五糖II、乳糖-N-二岩藻五糖II的唾液酸化衍生物、乳糖-N-己糖、乳糖-N-己糖的岩藻糖基化衍生物、唾液酸四糖(tetrasaccharide)a、唾液酸四糖a的岩藻糖基化衍生物、唾液酸四糖b、唾液酸四糖b的岩藻糖基化衍生物、唾液酸四糖c和唾液酸四糖c的岩藻糖基化衍生物。

6.非人类转基因哺乳动物，其中该哺乳动物的基因组包含至少一种操作性连接至乳腺特异性启动子、编码酶的DNA序列，其中所述至少一种DNA序列的表达导致在该哺乳动物乳中产生寡糖和糖蛋白。

7.权利要求6的非人类转基因哺乳动物，其中所述非人类哺乳动物选自小鼠、大鼠、兔子、猪、山羊、绵羊和乳牛。

8.权利要求6的非人类转基因哺乳动物，其中所述酶为糖基转移酶。

9.权利要求8的非人类转基因哺乳动物，其中所述糖基转移酶选自：岩藻糖基转移酶、半乳糖基转移酶、乙酰基转移酶、glucoronyl转移酶、葡糖酸差向异构酶、唾液酸转移酶、甘露糖基转移酶、磺基转移酶、β-乙酰半乳糖胺转移酶和N-乙酰葡糖胺转移酶。

10.权利要求6的非人类转基因哺乳动物，其中所述寡糖选自：半乳糖α1-3半乳糖β1-4葡萄糖、2’岩藻糖乳糖、3’岩藻糖乳糖、乳糖-N-新四糖、乳糖-N-四糖、乳糖-N-岩藻五糖、乳糖-N-岩藻五糖的唾液酸化衍生物、乳糖-N-岩藻五糖II、乳糖-N-岩藻五糖II的唾液酸化衍生物、乳糖-N-岩藻五糖III、乳糖-N-岩藻五糖III的唾液酸化衍生物、乳糖-N-岩藻五糖IV、乳糖-N-岩藻五糖IV的唾液酸化衍生物、乳糖-N-岩藻五糖V、乳糖-N-岩藻五糖V的唾液酸化衍生物、乳糖-N-二岩藻五糖I、乳糖-N-二岩藻五糖的唾液酸化衍生物、乳糖-N-二岩藻五糖II、乳糖-N-二岩藻五糖II的唾液酸化衍生物、乳糖-N-己糖、乳糖-N-己糖的岩藻糖基化衍生物、唾液酸四糖a、唾液酸四糖a的岩藻糖基化衍生物、唾液酸四糖b、唾液酸四糖b的岩藻糖基化衍生物、唾液酸四糖c和唾液酸四糖c的岩藻糖基化衍生物。