[发明专利]不含酯酶的酶

权利要求书

1.一种在具有酯酶活性和D-氨基酸氧化酶和/或戊二酰酰化酶活性的混合物中，在保存D-氨基酸氧化酶活性或戊二酰酰化酶活性的情况下，降低酯酶活性的方法，包括用苯基甲磺酰氟处理具有酯酶活性和D-氨基酸氧化酶活性和/或戊二酰酰化酶活性的混合物。

2.一种生产戊二酰基-7-氨基头孢烷酸的方法，包括以下步骤：

1)用苯基甲磺酰氟处理具有酯酶活性和D-氨基酸氧化酶活性的混合物，

2)用头孢菌素C与步骤1)得到的混合物反应以得到戊二酰基-7-氨基头孢烷酸；且如果需要，分离获得的戊二酰基-7-氨基头孢烷酸。

3.一种生产7-氨基头孢烷酸的方法，包括以下步骤：

1)用苯基甲磺酰氟处理具有酯酶活性和戊二酰酰化酶活性的混合物，

2)用戊二酰基-7-氨基头孢烷酸与步骤1)得到的混合物反应，以获得7-氨基头孢烷酸；且如果需要，分离步骤2)得到的7-氨基头孢烷酸。

4.一种从具有酶活性的微生物细胞生产球形颗粒的方法，包括以下步骤：

1)用含伯胺或仲胺的聚合物处理微生物细胞，

2)用可与水形成两相系统的有机溶剂与微生物细胞混合物接触，

3)用双功能剂处理步骤2)得到的混合物；并分离获得的球形颗粒。

5.可按包含以下步骤的方法获得的含有具有酶活性的微生物细胞的球形颗粒：

1)用含伯胺或仲胺的聚合物处理具有酶活性的微生物细胞，

2)用可与水形成两相系统的有机溶剂与微生物细胞混合物接触，

3)用双功能剂处理步骤2)获得的混合物；并分离获得的球形颗粒。

6.用包含要求5中定义的步骤的方法获得的球形颗粒。

7.一种生产戊二酰基-7-氨基头孢烷酸的方法，包括以下步骤：

1)用含伯胺或仲胺的聚合物处理具有D-氨基酸氧化酶活性的微生物细胞，

2)用可与水形成两相系统的有机溶剂与微生物细胞混合物接触，

3)用双功能剂处理步骤2)得到的混合物，并分离获得的球形颗粒，且如果需要，用苯基甲磺酰氟处理存在D-氨基酸氧化酶活性并具有酯酶活性的混合物，或用苯基甲磺酰氟处理存在D-氨基酸氧化酶并具有酯酶活性的从步骤3)获得的球形颗粒，

3)用头孢菌素C与从步骤3)获得的球形颗粒反应以获得戊二酰基-7-氨基头孢烷酸，且如果需要，分离戊二酰基-7-氨基头孢烷酸。

8.一种生产戊二酰基-7-氨基头孢烷酸的方法，包括用头孢菌素C与可根据权利要求7定义的步骤3)获得的球形颗粒反应，获得戊二酰基-7-氨基头孢烷酸，且如果需要，分离戊二酰基-7-氨基头孢烷酸。

9.一种生产7-氨基头孢烷酸的方法，其中根据权利要求2的步骤2)和权利要求7的步骤4)得到的戊二酰基-7-氨基头孢烷酸被转化成7-氨基头孢烷酸。

10.权利要求4的方法或权利要求5的球形颗粒在从头孢菌素C或戊二酰基-7-氨基头孢烷酸生产7-氨基-3-羟甲基-3-头孢烯-4羧酸中的应用。

11.一种生产7-氨基头孢烷酸的方法，包括以下步骤：

1)用含伯胺或仲胺的聚合物处理具有戊二酰酰化酶活性的微生物细胞，

2)用可与水形成两相系统的有机溶剂与微生物细胞混合液接触，

3)用双功能剂处理从步骤2)得到的混合物；并分离获得的球形颗粒，

4)如果需要，用苯基甲磺酰氟处理存在戊二酰酰化酶并具有脂酶活性的混合物或用苯基甲磺酰氟处理从步骤3)获得的存在戊二酰酰化酶活性并具有酯酶活性的球形颗粒，

5)用戊二酰基-7-氨基头孢烷酸与从步骤3)或步骤4)获得的球形颗粒反应以获得7-氨基头孢烷酸，且如果需要，分离获得的7-氨基头孢烷酸。

12.一种生产头孢菌素的方法，其中根据权利要求3-9中任一项生产的7-氨基头孢烷酸或7-氨基-3-羟甲基-3-头孢烯-4羧酸被用作中间体。

13.根据权利要求1-4、7-9或11-12中任一项的方法生产的产品。