[发明专利]促使造血干细胞运动的方法

说明书

发明的领域

本发明总体上涉及用于使造血干细胞运动的方法以及一种脱酰胺趋化因子。

发明的背景

所有的intercrine或趋化因子家族都是碱性的肝素结合多肽，它们都含有四个半胱氨酸，形成两对二硫键。所有这些功能已经被确定的蛋白被发现参与了前期炎症前和／或促修复功能。

在使用高剂量化学治疗的临床情形中，首选的生物分子是G-CSF。通常，在这种治疗中，先用低剂量的化学治疗剂，如环磷酰胺，使患者具有易感性。在缓解的过程中，用CSF，如用G-CSF，给患者进行治疗，这使得细胞最终从骨髓运动到外周循环中，以便获得用于白细胞分离复置法的血液。此后，给患者施用高剂量的化学治疗剂以诱导其癌症的临床上的缓解。由此造成的骨髓衰竭通过输注原先收集并储存的血细胞来治疗。这一过程可以通过，例如省略初始的化学治疗剂量及／或改变血液收集方法进行修改。

虽然这些造血干细胞移植技术的应用看起来是有希望的，但是为了获得足以成功地进行移植的干细胞以治疗单独使用G-CSF时的严重的骨髓抑制，必须进行多次血浆分离置换步骤[看，例如Bensinger et al．，血液，81：3158(1993)以及R．Haas et al．，肿瘤学研讨报告21：19(1994)]。因此，虽然有了这些显著的进展和一些特定的调控性生物分子的有效性，对于骨髓抑制患者来说，造血功能恢复的滞缓仍是发病和致死的一个重要原因。

本领域对用于增强造血功能恢复，具体地是用于与化学治疗相关的骨髓抑制情形中，的组合物和方法有持续的需要。

本发明的概述

在一个方面，本发明提供了把趋化因子用于制备用于刺激造血干细胞的药剂的应用方法。这一趋化因子包括源于KC、groβ、groα、以及groγ的蛋白，包括这些趋化因子的成熟的、经过修饰的以及多聚体的形式。

在另一方面，本发明提供了一种促使动物造血干细胞运动的方法，包括给动物施用有效量的此处所述的成熟的、经过修饰的或多聚体形式的趋化因子。

在另一方面，本发明提供了经过修饰的groβ(序列标号第三号的第5-73号氨基酸)的一种新颖的脱酰胺形式，它对于使造血干细胞运动是有用的。

本发明的其它方面及优点在下列本发明的优选实施例的详细描述中进行进一步的描述。

附图的简要说明

图1：显示groβ(序列标号第三号的第1-73号氨基酸)在实施例1中的单药剂促动(mobilization*)化验中的作用。

图2：显示经过修饰的groβ(序列标号第三号的第5-73号氨基酸)在实施例1中的单药剂促动化验中的作用。

图3：该条线图显示了在实施例1中的单药剂促动化验中磷酸盐缓冲液(PBS)、IL-8、groβ(序列标号第三号的第1-73号氨基酸)以及经过修饰的groβ(序列标号第三号的第5-73号氨基酸)之间的比较。

本发明的详细描述

本发明提供了用于治疗骨髓抑制的方法，通过使用此处所述的成熟的、经过修饰的或多聚体形式的趋化因子使造血干细胞从骨髓运动到外周血液中。

本发明还提供了截短的groβ(序列标号第三号的第5-73号氨基酸)的一种新颖的脱酰胺形式，以及它的一种药学组合物以及它在骨髓抑制治疗中的应用。

脱酰胺主要发生在第69位(用1-73命名法来定义Groβ的全长)。脱酰胺形成a及b两种天冬氨酸同质异构体，即天冬氨酸和异天冬氨酸。

令人吃惊地发现这种脱酰胺的形式保持了原体截短的groβ(5-73)的促动活性。这是出人意料的，因为其它的肽在其天冬酰胺被变为天冬氨酸或异天冬氨酸时都丧失了活性(Bongers et al．，国际肽蛋白研究杂志1992年4月：364-74；Friedmen et al．，国际肽蛋白研究杂志1991年1月：37(1)：14-20)。单独的脱酰胺(第69位)的截短的groβ(序列标号第三号的第5-73号氨基酸)或者其与没有脱酰胺的截短的groβ原体的混合物也可以被用于通过促使造血干细胞从骨髓运动到外周血管中来治疗骨髓抑制。

1．定义

如此处所定义的，“造血协同因子”或“HSF”指的是一族蛋白，包括天然及经过修饰的趋化因子，其特征在于当把其与另外一种造血因子，如集落刺激因子，或与循环中天然的CSF一起体内或体外结合施用时，它具有刺激造血作用的协同活性。