[发明专利]编码哺乳动物内切葡糖醛酸糖苷酶的分离的核酸分子及其应用

权利要求书

1．一种分离的核酸分子，其包含与&#60400&#6212或&#60400&#6214或&#60400&#6216或&#60400&#6218中的任一个或其互补序列至少有80％同一性的核苷酸序列，并且其编码一种具有哺乳动物内切葡糖醛酸糖苷酶活性的多肽。

2．权利要求1的分离的核酸分子，其中内切葡糖醛酸糖苷酶活性是乙酰肝素酶。

3．权利要求2的分离的核酸分子，其包含&#60400&#6212所示的核苷酸序列或其互补核苷酸序列。

4．权利要求2的分离的核酸分子，其包含&#60400&#6216所示的核苷酸序列或其互补核苷酸序列。

5．权利要求2的分离的核酸分子，其包含&#60400&#6218所示的核苷酸序列或其互补核苷酸序列。

6．一种分离的核酸分子，其包含编码一种哺乳动物内切葡糖醛酸糖苷酶多肽的核苷酸序列，该多肽包含与选自下列的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列：

(ⅰ)&#60400&#621-&#60400&#6211或&#60400&#6223中任一个所示的氨基酸序列；

(ⅱ)&#60400&#6213所示的氨基酸序列；

(ⅲ)&#60400&#6217所示的氨基酸序列；

(ⅳ)&#60400&#6219所示的氨基酸序列；

(ⅴ)能从HSPG上除去HS侧链的(ⅰ)-(ⅳ)中任一个的同源物、类似物或衍生物；和

(ⅵ)能从HSPG上除去HS侧链的&#60400&#6215的同源物、类似物或衍生物。

7．权利要求6的分离的核酸分子，其中内切葡糖醛酸糖苷酶活性是乙酰肝素酶。

8．权利要求7的分离的核酸分子，其编码&#60400&#6213所示的氨基酸序列或&#60400&#6213的氨基酸残基158-543。

9．权利要求7的分离的核酸分子，其编码&#60400&#6217所示的氨基酸序列。

10．权利要求7的分离的核酸分子，其编码&#60400&#6219所示的氨基酸序列。

11．一种鉴定编码哺乳动物内切葡糖醛酸糖苷酶多肽的核酸分子的方法，其至少包括下列步骤：

(ⅰ)在足以发生杂交的时间内和条件下，使来源于哺乳动物细胞、组织或器官的基因组DNA、mRNA或cDNA与杂交有效量的一种或多种探针或引物分子杂交，该分子包含长度至少为10个的邻接核苷酸，由&#60400&#6212或&#60400&#6214或&#60400&#6216或&#60400&#6218中的任一个衍生而来；和

(ⅱ)检测该杂交。

12．权利要求11的方法，其进一步包括分离杂交的核酸分子的步骤。

13．权利要求11的方法，其中检测杂交的步骤包括聚合酶链反应形式。

14．权利要求11的方法，其中检测杂交的步骤包括引物延伸。

15．权利要求11的方法，其中检测杂交的步骤包括检测与探针或引物共价结合的报道分子。

16．一种表达载体，其包含与启动子序列有效连接的权利要求1的分离的核酸分子。

17．权利要求16的表达载体，其中启动子是多角体启动子或CMV启动子。

18．一种表达载体，其包含与启动子序列有效连接的权利要求6的分离的核酸分子。

19．权利要求18的表达载体，其中启动子是多角体启动子或CMV启动子。