[发明专利]生产淀粉酶的方法

权利要求书

1．一种生产编码用于洗涤应用的新淀粉酶的DNA的方法，该方法包括：

(a)通过化学和／或酶促方法进行随机突变，在编码淀粉酶的一个或几个DNA上产生单一或双位点突变；

(b)将来自步骤(a)的突变型DNA整合到能表达淀粉酶的微生物中；

(c)将来自步骤(b)的生物分离成单一的分离体，以便在每一个分离体中存在最低数量，优选平均大约1个含有突变型DNA的生物；

(d)由上述一个或几个分离体生产淀粉酶；

(e)从一个或几个分离体中收集突变型DNA，所述分离体能产生淀粉酶，在存在至少包括表面活性剂、助剂和／或漂白剂的洗涤组合物成分的条件下，这种淀粉酶水解淀粉的速度至少比亲代淀粉酶快大约25％，水解活性水平优选至少比具有SEQ ID 1的淀粉酶快大约25％；

(f)选择性地在一个独立的步骤中或与步骤(a)-(e)中任一个步骤同时进行DNA改组；

(g)选择性地重复步骤(a)-(f)一次或几次，然后收集所述突变型DNA。

2．一种生产能产生用于洗涤应用的淀粉酶的生物的方法，该方法包括：

(a)通过化学和／或酶促方法进行随机突变，在编码淀粉酶的一个或几个DNA上产生单一或双位点突变；

(b)将来自步骤(a)的突变型DNA整合到能表达淀粉酶的微生物中；

(c)将来自步骤(b)的生物分离成单一的分离体，以便在每一个分离体中存在最低数量，优选平均大约1个含有突变型DNA的生物；

(d)由上述一个或几个分离体生产淀粉酶；

(e)收集来自一个或几个分离体的含有突变型DNA的生物，所述分离体能产生淀粉酶，在存在至少包括表面活性剂、助剂和／或漂白剂的洗涤组合物成分的条件下，这种淀粉酶水解淀粉的速度至少比亲代淀粉酶快大约25％，水解活性水平优选至少比具有SEQ ID 1的淀粉酶快大约25％；

(f)选择性地在一个独立的步骤中或与步骤(a)-(e)中任一个步骤同时进行DNA改组；

(g)选择性地重复步骤(a)-(f)一次或几次，然后收集能产生所述淀粉酶的含有突变型DNA的生物。

3．洗涤剂组合物，包括：

(a)重量百分比大约0．0001％-大约2％的淀粉酶，其水解活性水平至少比具有SEQ ID 1的淀粉酶的水解活性快大约25％，这种淀粉酶是由含有通过权利要求1或2中任一项的方法制备的突变型DNA的生物生产的；和

(b)大约98％-99．9999％的洗涤组合物成分，包括表面活性剂、助剂和漂白剂中的一种或几种。

4．根据权利要求3的洗涤剂组合物，含有重量百分比至少大约5％的阴离子型表面活性剂，所述表面活性剂优选选自烷基硫酸盐、烷基乙氧基硫酸盐和／或直链亚烷基磺酸盐。

5．根据权利要求3或4中任一项的洗涤剂组合物，含有至少大约2％的烷基乙氧基化物非离子型表面活性剂。

6．根据权利要求3-5中任一项的洗涤剂组合物，含有阳离子型和阴离子型表面活性剂。

7．根据权利要求3-6中任一项的洗涤剂组合物，含有蛋白酶和／或纤维素酶。

8．根据权利要求3-7中任一项的洗涤剂组合物，含有漂白剂，该漂白剂优选选自过碳酸盐、过硼酸盐及其混合物，和／或漂白活化剂，更优选选自下列物质的疏水性漂白活化剂：四乙酰基乙二胺(TAED)、苯甲酰基己内酰胺(BzCL)，4-硝基苯甲酰基己内酰胺，3-氯苯甲酰基己内酰胺，苯甲酰基羟苯磺酸盐(BOBS)，壬酰基羟苯磺酸盐(NOBS)，苯甲酸苯酯(PhBz)，癸酰基羟苯磺酸盐(C₁₀-OBS)，苯甲酰基戊内酰胺(BZVL)，辛酰基羟苯磺酸盐(C₈-OBS)，可以过水解的酯，4-[N-(壬酰基)氨基己酰氧基]-苯磺酸钠盐(NACA-OBS)，月桂基羟苯磺酸盐(LOBS或C₁₂-OBS)，10-十一碳烯酰基羟苯磺酸盐(UDOBS或C₁₁-OBS，在10位置上不饱和)，和癸酰基羟苯甲酸(DOBA)及其混合物。

9．根据权利要求3-8中任一项的洗涤剂组合物，含有一种染料转移抑制剂。

1O．根据权利要求3-9中任一项的洗涤剂组合物，含有一种分散剂。

11．根据权利要求3-10中任一项的洗涤剂组合物，含有绿土粘土。