[发明专利]一种人肌动蛋白相关蛋白亚基及其编码序列

说明书

本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种新的人基因核苷酸序列。更具体地说，本发明涉及人Arp2/3蛋白复合物p16-Arc亚基(Arp2/3 proteincomplex subunit p16-Arc)-2(简称为ARC16-2)的cDNA序列，该cDNA编码的蛋白是p16-Arc家族的成员。本发明还涉及由该核苷酸序列编码的多肽，这些多核苷酸和多肽的应用，以及所述多核苷酸和所述多肽的生产方法。

肌动蛋白作为细胞骨架的主要成分为细胞的运动、形态变化、胞内结构提供动力和框架。肌动蛋白的聚合能驱动移动细胞前缘的突起。肌动蛋白对于细胞中含肌球蛋白的收缩性结构(如胞质分裂的分裂沟)组装和功能是必须的，另外，肌动蛋白于保证细胞结构的完整性，以及在调节细胞粘附和膜动态变化方面密切有关。

近期研究表明，基于肌动蛋白的结构的组装和维持很可能依赖于肌动蛋白相关蛋白(Actin-related protein，简称为“Arp”)2/3复合物的活性(see review，Machesky，L.M.et al.Curr.Opon.Cell Biol.1999，11：117-121)。

Arp2/3复合物在真核生物中保守，它最早在Acanthamaoeba中通过肌动蛋白抑制蛋白琼脂糖亲和层析被鉴定(Machesky，L.M.et al.J.Cell.Biol.1994，127：107-115)。在酵母和哺乳动物中，Arp2/3复合物由7个亚基组成，组成比例为1∶1(Machesky，L.M.et al.J.Cell.Biol.1994，127：107-115；Welch，M.D.et al.J.Cell Biol.1997，138：375-384；Winter，D.et al.Curr.Biol.1997，7：519-529；Mullins，R.D.et al.J.Cel Biol.1997，136：331-343；Machesky，L.M.et al.Biolchem.J.1997，328：105-112)。在不同的物种中，7个亚基由于大小不同而名称也有所不同，在哺乳动物中被分别称为Arp2，Arp3，p41-Arc，p34-Arc，p21-Arc，p20-Arc，p16-Arc(Welch，M.D.et al.J.Cell Biol.1997，138：375-384)。ARC-16亚基在其它生物中的名称分别为Arc15p(Saccharomyces cerevisiae)，arc15p(Schizosaccharomyecespombe)，p14(Acanthamoeba和Dictyostelium)(see review，Machesky，L.M.et al.Curr.Opon.Cell Biol.1999，11：117-121)。

然而，在本申请之前还没有分离或公开过人ARC16-2的核苷酸序列和氨基酸序列。

本发明的一个目的是提供一种新的多核苷酸，该多核苷酸被命名为人ARC16-2，它编码人Arp2/3复合物的亚基之一ARC16-2，该亚基的功能与Arp2/3复合物的功能相关。

本发明的另一个目的是提供一种新的人ARC16-2蛋白。

本发明的再一个目的是提供一种利用重组技术生产所述的新的人的ARC16-2多肽的方法。

本发明还提供了这种人的ARC16-2核酸序列和多肽的应用。

在本发明的一个方面，提供了一种分离出的DNA分子，它包括：编码具有人ARC16-2蛋白活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.3中从核苷酸8-466位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在中度严紧条件下与SEQ ID NO.3中从核苷酸8-466位的核苷酸序列杂交。较佳地，所述的序列编码一多肽，该多肽具有SEQ ID NO.4所示的序列。更佳地，该序列具有SEQ ID NO.3中从核苷酸8-466位的核苷酸序列。

在本发明的另一方面，提供了一种分离的人ARC16-2蛋白多肽，它包括：具有SEQ ID NO.4氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段，或其活性衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO.4序列的多肽。

在本发明的另一方面，提供了一种载体，它含有上述分离出的DNA。

在本发明的另一方面，提供了一种所述载体转化的宿主细胞。

在本发明的另一方面，提供了一种产生具有人ARC16-2蛋白活性的多肽的方法，该方法包括：