[发明专利]一种新的人蛋白质及其编码序列,以及制法和用途

说明书

本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种新的人基因核苷酸序列。更具体地说，本发明涉及人OSP的cDNA序列，该cDNA编码的蛋白是大鼠PRAP和小鼠m17HSD7的同系物。本发明还涉及由该核苷酸序列编码的多肽，这些多核苷酸和多肽的应用，以及所述多核苷酸和所述多肽的生产方法。

生物体的各个组织器官的发育在时空上受到机体的严密调控。在不同组织中，在生物体不同的发育阶段中，往往有一特异性的蛋白表达。这些蛋白或是对组织的发育有调控作用，或是由组织发育到一定阶段后才被诱导表达行使一定的功能。

早在1990年，Mclean等(Mclean et al．Endocrinology 1990，126(4)：1796-1805)就报导在怀孕大鼠中特异表达黄体(corpus luteum)中的一个约32KDa的蛋白。他们进一步的研究表明，该蛋白仅在大黄体细胞(large luteal cell)中被表达和磷酸化，并且它的表达可以受到黄体中合成的雌激素的调控。这样，该蛋白被认为是大黄体细胞和雌激素的功能的一个重要的标记。二年后，他们又报导该蛋白在孕中期的大鼠的大黄体细胞中有大量的表达，而这一时期又恰好是黄体细胞体积显著增加，功能显著增强的时期。研究同时显示该蛋白的表达受到多种tropichormones(包括雌激素和催乳素(PRL))的调控。这些结果表明该蛋白可能在黄体的生长和功能调控方面有着重要作用(Parmer et al．Endocrinology，1992，131(5)：2213-2221)。

1996年，同一实验室应用功能克隆法，成功地克隆了编码这一蛋白的cDNA(Duan et al．J．Biol．Chem．1996，341(26)：15602-15607)。该cDNA推导的氨基酸序列与已知的蛋白没有显著的同源性。运用免疫沉淀法发现，该蛋白可与PRL受体结合。已知PRL受体具有多种构型。如，在大鼠中就有两种PRL受体，一种为长链受体，另一种为短链受体。两者具有相同的胞外和穿膜区，但是其胞内部分的长度和氨基酸序列是不同的(Boutin et al．Cell 1988，53：69-77；Shirota et al．Mol．Endocrinol．1990，4：1136-1143；Zhang et al．Biochem．Biophys．Res．Commun1990，168：415-422)。当PRL与长链受体结合后，可以通过Jak2-STAT5途径进而诱导相应的蛋白表达。但对同短链受体在PRL信号传导中的作用则不甚明了。为了探明所发现的蛋白究竟与哪一种PRL受体结合，运用重组蛋白的手段研究发现该蛋白与PRL短链受体结合，并因此而被命名为催乳素受体相关蛋白(PRLreceptor associated protein，PRAP)。以上事实提示PRAP在介导PRL的信号传导中发挥重要作用。

有趣的是不久以后，Nokelainen等(Nokelainen，et al．MolecularEndocrinology 1998，12：1048-1059)又报导在小鼠中克隆了一个新的cDNA，该cDNA编码一37KDa的蛋白(被命名为m17HSD7，17 β-Hydroxysteroiddehydrogenases／17-ketosteroid reductases 7(17 β-羟基类固醇脱氢酶／17-酮类固醇还原酶7))，并与大鼠PRAP(rPARP)具有89％的同一性。结构分析发现，该37KDa蛋白具有短链脱氢酶／还原酶家族成员的特征。对m17HSD7及rPARP的酶活性分析发现两者都可催化雌酮(E1)向雌二酮(E2)的转变。以上证据以表明m17HSD7和rPARP是17HSD家族成员。

然而，在本发明之前，还没有公开或分离出人OSP的序列。

本发明的一个目的是提供一种新的多核苷酸，该多核苷酸编码大鼠PRAP和小鼠m17HSD7的同系物，本发明的cDNA被命名为人OSP。

本发明的另一个目的是提供一种新的人的大鼠PRAP和小鼠m17HSD7的同系物蛋白，该蛋白被命名为人OSP蛋白。本发明涉及的OSP cDNA和蛋白质与上述大鼠PARP和小鼠m17HSD7有高度的同源性，被认为是它们在人中的同系物，即可能是人PRL短链受体或是人17HSD家族成员之一(迄今已在人中发现了4种不同的17HSD)。

本发明的再一个目的是提供一种利用重组技术生产所述的新的人OSP多肽的方法。

本发明还提供了这种人OSP核酸序列和多肽的应用。