[发明专利]具有IL－1受体拮抗活性的微生物多糖或其盐或水解产物，其制备方法和含有它的药物组合物

说明书

本发明涉及一种作为白细胞介素-1(IL-1)受体拮抗剂的微生物多糖、其制备方法、含有它的药物组合物和它在制备用于治疗或预防可通过抑制IL-1活性而得以缓解的疾病的药物中的用途，还涉及能够产生所述微生物多糖的放线菌139。

迄今为止，已发现植物、动物和微生物中存在数百种碳水聚合物，它们在机体生命过程中起着各种各样的作用，如能量储存，结构成份，作为调控和信息系统等。由于微生物多糖具有显著亲水性，因此其商业应用前景广阔。近20年，国内外各类多糖药物不断进入临床，用于抗感染、抗肿瘤、抗风湿、抗消化道溃疡和增进免疫功能等，近年在抗血脂、抗衰老方面也有发展。目前如香菇多糖、灵芝多糖、银耳多糖、猪苓多糖、虫草多糖等均已用于临床，但对其糖链基本结构及与体内相应作用机理研究较少。Yoshidazu Morishita等，Biochemical and Biophysical Research Communications，1991；176(3)：949-957报道，从微生物Aureo basidium产物中发现了多糖HS-142-1，它是心钠素的受体拮抗剂，并对其化学性质进行了较深入研究，该多糖是第一个选择性作用于心钠素受体的非肽类拮抗剂。目前还没有发现高分子量多糖可以作为IL-1受体拮抗剂。

IL-1是一种重要的细胞因子，具有广泛的生物学活性，几乎对各种类型的细胞都有影响，同时与其它细胞因子和小分子介质相互联系。它不仅参与多种生理过程，如免疫活性细胞的调节、造血、神经内分泌及抗肿瘤等，同时与许多疾病的病理变化有关。例如，本领域已知IL-1参与下列多种病理变化过程：炎性疾病、败血性休克、风湿性关节炎、炎性肠疾病、急性或慢性骨髓白血病、胰岛素依赖性糖尿病、动脉粥样硬化、发热、病理性移植排斥反应、移植物抗宿主疾病、牙周组织病、自身免疫性甲状腺炎症、酒精中毒性肝炎、急性疾病血清蛋白改变、紫外线照射致皮肤损伤、嗜睡、厌食、通风、牛皮癣、哮喘及骨质疏松等。在这些疾病过程中降低IL-1的作用已成为一种治疗这些疾病的潜在方法。因而迫切需要各种来源的IL-1受体拮抗剂。

本发明的发明人出人意外地发现，从放线菌菌株139的培养物中分离的多种高分子量多糖具有显著的IL-1受体拮抗活性，体内研究表明多糖139A具有抗炎作用。

因此，本发明涉及一种分离的微生物多糖或其盐或具有IL-1受体拮抗活性的水解产物，其特征在于所述微生物多糖的重均分子量Mw＝1×10⁵-12×10⁵；其含有鼠李糖、木糖、甘露糖、阿拉伯糖、岩藻糖、半乳糖和半乳糖醛酸，含有或不含有葡萄糖。

本发明还涉及一种分离的微生物多糖或其盐或具有IL-1受体拮抗活性的水解产物的制备方法，其特征在于将放线菌139在适合其生长的条件下培养一段时间，然后从培养物中分离所述微生物多糖或其盐，或进一步水解所分离的多糖，或进一步将所分离的游离酸转化为盐或将其盐转化为游离酸形式。

本发明另一方面涉及含有上述微生物多糖或其可药用盐或可按上述方法获得的微生物多糖或其可药用盐和可药用载体的药物组合物。

本发明也涉及上述微生物多糖或其可药用盐或可根据上述方法获得的微生物多糖或其可药用盐在制备用于治疗或预防可通过抑制IL-1活性得以缓解的疾病的药物的用途。

本发明再一方面涉及能够产生上述多糖或可用于上述方法的微生物菌株放线菌139。

如上所述，本发明涉及一类新型微生物多糖，它们具有IL-1受体拮抗活性。这些微生物多糖的重均分子量Mw＝1×10⁵-12×10⁵，优选为4×10⁵-10×10⁵，更优选为6×10⁵-9×10⁵，最优选为约6.33478×10⁵。

上述多糖分子量是用已知分子量的葡聚糖(Fluka)作为标准参照通过凝胶色谱法测定的。色谱条件如下：柱为GF-7MHQ ShodexAsahipak凝胶柱(7.6×300mm)；流动相为0.1M NaNO₃；流速为0.5ml/min；柱温为35℃；检测器为RID-6A示差折光检测器。在上述条件下，本发明微生物多糖的保留时间在8-25分钟，优选在10-20分钟之间，特别优选为约11.5、11.6、15.0或19.4分钟。