[发明专利]人RIP110蛋白及其编码序列

说明书

本发明涉及分子内分泌学、基因工程学、肿瘤学、发育生物学领域。具体地，本发明涉及一种在人类下丘脑中表达的RIP110蛋白及其核酸序列。本发明还涉及该蛋白和核酸序列的制备方法和用途。

大量证据表明，维生素A的代谢产物维甲酸(retinoids)在哺乳动物胚胎发育和成体生理过程中均有重要作用。维甲酸在胚胎发育中作为信号分子(Semin Cell Biol.1994Apr；5(2)：115-25.Review.)，参与了多种不同胚胎结构的形成，包括脸，心，眼，四肢和神经系统(J Nutr.1998 Feb；128(2 Suppl)：467S-470S.Review.)。通过对维甲酸缺陷型胚胎进行维甲酸处理及各种维甲酸受体缺失突变体的研究发现，维甲酸及其受体参与了这些过程。通过对维甲酸受体缺失突变体中的产生的多种异常情况的观察，发现胚胎发育中有大量的维甲酸的配体-受体反应。

维甲酸能抑制肺癌，乳腺癌细胞的增殖，抑制致癌物质诱导的支气管原鳞状细胞癌和乳房肿瘤细胞的生长，因而被用作这两种癌的化学预防剂。而进一步研究发现，维甲酸受体缺失导致了部分癌细胞对维甲酸耐受(Mutat Res.1996 Feb 19；350(1)：267-77.Review.)。

维甲酸功能由核激素受体家族的各种成员受体介导(Int J Biochem Cell Biol.1997Feb；29(2)：275-8.Review；FASEB J.1996 Jul；10(9)：940-54.Review)。迄今为止，该家族已被鉴定的成员主要有视黄酸受体(Retinoic acid receptors，RARs)和维甲酸X受体(Retinoid X receptors，简称为“RXRs”)两大类，每一类都有α，β，γ三个成员；另外该家族还包括了类固醇、甲状腺素、维生素D3、以及其它配体等的各自受体。每个家族成员都有六个功能域(A至F)。除此之外该家族还有些未知其配体的被称做孤儿受体的成员(Leukemia.1994；8 Suppl 3：S1-10.Review.)。这些受体蛋白响应它们特异性配体的活化作用后，结合到目标基因的特定位点上直接调节转录过程，而该位点包含有六核苷酸一致序列“AGGTCA”。多数受体成员与RXR结合成异二聚体后能极大增强与其特异性配体之间的亲和力。

1995年，Wongi Seol等用酵母双杂交系统分离了小家鼠(Mus musculus)中几种编码维甲酸X受体作用蛋白(RXR-interacting protein，简称为“RIP”)的cDNA(MolEndocrinol.1995 Jan；9(1)：72-85．)。在他们所研究的四种RIP中，RIP14与RIP15明显是核受体家族的尚未被鉴定的孤儿成员。RIP110仅在RXR特异性配体9-顺式维甲酸(9-cis-RA)存在下生长的酵母细胞中起作用，其配体依赖性暗示它可能与配体依赖型转录或其它激活过程直接相关。而RIP13与四种成员之间的反应则不受9-cis-RA存在与否的影响。RIP110及RIP13还和其它几种受体家族成员作用。

在本发明被公布之前，尚未有任何公开或报道过人类RIP110蛋白。

本发明的第一目的就是提供一种新的人基因RIP110(Genbank AccessionNo.AF113538)，该基因是一种编码人维甲酸X受体作用蛋白RIP110的基因。

本发明的第二目的是提供一种新的人蛋白-人RIP110蛋白。

本发明的第三目的是提供一种利用重组技术生产上述的新的人RIP110蛋白和核酸序列的方法。

本发明还提供了这种人RIP110蛋白多肽和编码序列的应用。

在本发明的一个方面，提供了一种分离出的DNA分子，该分子包括：编码具有人RIP110蛋白质活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.6中从核苷酸第22-1069位DNA分子的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在中度严紧条件下与SEQID NO.6中从核苷酸第22-1069位的核苷酸序列杂交。较佳地，所述的序列编码具有SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列的多肽。更佳地，所述的序列具有SEQ ID NO.6中从核苷酸第22-1069位的核苷酸序列。

在本发明的另一方面，提供了一种分离出的人RIP110蛋白质多肽，它包括：具有SEQ ID NO.7氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段，或其活性衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO.7序列的多肽。