[发明专利]一种新的多肽——人环管蛋白69和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人环管蛋白69，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

细胞之间的相互通讯联系在多细胞的有机体中起着及其重要的作用。由于细胞间存在着精细的分工，一些细胞群体有赖于其他细胞群体，并要求其他细胞群体对其产生应答反应。这种精巧的细胞间通讯网络可以控制细胞的生长、分裂、死亡、分化形成组织以及各种其他的生命过程。

在许多种系生物的精子和卵子发育过程中，发育中的精子或卵子通过环管从其周围的细胞里得到营养物质。环管的形成与肌动蛋白纤维有关。现在已经知道有一些基因参与环管的组装和功能，其中一类是含有Kelch结构域的基因家族。Kelch蛋白家族都含有两个共同的结构，在N末段有BTB/POZ区域，在C末段有kelch重复序列[Soltysik-Espanola M et al,Mol biol Cell 1999 Jul]。

现在已经发现的kelch蛋白家族是肌动蛋白结合蛋白，或与肌动蛋白有关。Kelch蛋白家族在环管形成、神经纤维定位、细胞融合、细胞形态形成等在发育过程中与细胞骨架有关的生理过程中起重要作用[Soltysik-espanola M,Mol biol Cell1999；Philips J,J Cell biol 1998；]。例如，在果蝇中，kelch蛋白被定位在环管的内侧面，它使环管侧面保持紧束的状态。Kelch蛋白突变会造成卵子周围的护卫滋养细胞通过环管向卵子输送胞质这一过程受到阻碍[Xue F,Cooley L,Cell 1993Mar 12]。Kel-1蛋白的缺失会导致幼虫早期的生长停滞[Ohmachi M,genes Cells1999]。由于在包括人在内的许多生物的精子、卵子形成过程中都发现了环管结构和具有kelch结构的蛋白，因此可以认为kelch蛋白对精卵形成的作用具有普遍意义。又如在脑内发现的kelch蛋白Mayven可能在脑细胞肌动蛋白细胞骨架的动态组织中起作用[Soltysik-Espanola M,Mol Biol Cell 1999]。

本发明的人的基因与果蝇kelch蛋白在蛋白水平上有74％的同源性。其与kelch蛋白家族的特征性结构域---kelch结构域非常相似，且含有kelch结构域中的几个高度保守的氨基酸残基。基于以上各点，故认为本发明的新基因为一编码人与kelch蛋白家族kelch结构域相似的基因，命名为人环管蛋白69。并以此推断其与kelch结构域相似，具有相似的生物学功能。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人环管蛋白69以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人环管蛋白69的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人环管蛋白69的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人环管蛋白69的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人环管蛋白69的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人环管蛋白69的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人环管蛋白69异常相关的疾病的方法。

在本发明的第一方面，提供新颖的分离出的人环管蛋白69，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物、类似物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

在本发明的第二方面，提供编码分离的这些多肽的多核苷酸，该多核苷酸包含一核苷酸序列，该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少75％相同性：(a)编码上述人环管蛋白69的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。较佳地，该多核苷酸编码具有SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的多肽。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中462-2342位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-3488位的序列。

在本发明的第三方面，提供了含有上述多核苷酸的载体，以及被该载体转化或转导的宿主细胞或者被上述多核苷酸直接转化或转导的宿主细胞。

本发明的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。