[发明专利]人肿瘤相关核蛋白24及其编码序列

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽-人肿瘤相关核蛋白24，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

人肿瘤相关核蛋白基因编码的是一种核蛋白，编码此蛋白的基因至少通过三种不同的剪接方式编码三种独立的蛋白质，并且其中至少一种蛋白是细胞核蛋白，而其他蛋白在细胞质中。

人肿瘤相关核蛋白基因编码的蛋白是一种DNA结合蛋白，它被认为通过与P53基因结合来调控DNA复制，野生型P53基因是一种负调控的癌基因。而人肿瘤相关核蛋白基因的过量表达与肿瘤发生有紧密的相关性。

人肿瘤相关核蛋白基因由于其5′基因功能域的特征而被认为是类似看家基因的“生长控制”基因。这类基因家族的特征包括：高G+C碱基比例含量，无CCAAT和TATA盒，存在潜在的转录因子SP1结合位点及多重转录起始位点。这类基因在广泛的组织种类中处于一种低表达的水平。人肿瘤相关核蛋白基因是一种进化保守的并在细胞代谢过程中起作用的基因(The Journal of Biological Chemistry,Vol263：22,17150-17158,1988)。

已表明，肿瘤相关核蛋白与一些疾病相关，例如恶性肿瘤、血液病、免疫性疾病等。因此，为治疗目的研究和开发人肿瘤相关核蛋白及其激动剂/抑制剂有重要意义。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽-人肿瘤相关核蛋白24以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人肿瘤相关核蛋白24的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人肿瘤相关核蛋白24的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人肿瘤相关核蛋白24的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽-人肿瘤相关核蛋白24的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽-人肿瘤相关核蛋白24的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断和治疗与人肿瘤相关核蛋白24异常相关的疾病的方法。

在本发明的第一方面，提供新颖的分离出的人肿瘤相关核蛋白24，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物、类似物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

在本发明的第二方面，提供分离的编码这些多肽的多核苷酸，该多核苷酸包含一核苷酸序列，该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少74％相同性：(a)编码上述人肿瘤相关核蛋白24的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。较佳地，该多核苷酸编码具有SEQ ID NO：2所示氨基酸序列的多肽，更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中60-728位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2093位的序列。

在本发明的第三方面，提供了含有上述多核苷酸的载体，以及被该载体转化或转导的宿主细胞或者被上述多核苷酸直接转化或转导的宿主细胞。

在本发明的第四方面，提供了制备具有人肿瘤相关核蛋白活性的多肽的制备方法，该方法包含：(a)在适合表达人肿瘤相关核蛋白的条件下，培养上述被转化或转导的宿主细胞；(b)从培养物中分离出具有人肿瘤相关核蛋白活性的多肽。

在本发明的第五方面，提供了与上述的人肿瘤相关核蛋白多肽特异性结合的抗体。还提供了可用于检测的核酸分子，它含有上述的多核苷酸中连续的10-800个核苷酸。

在本发明的第六方面，提供了模拟、促进、拮抗人肿瘤相关核蛋白多肽活性的化合物，以及抑制人肿瘤相关核蛋白多肽的表达的化合物。还提供了筛选和/或制备这些化合物的方法。较佳地，该化合物是人肿瘤相关核蛋白多肽的编码序列或其片段的反义序列。

在本发明的第七方面，提供了用上述化合物来调节人肿瘤相关核蛋白在体内、体外活性的方法。

在本发明的第八方面，提供了一种检测与人肿瘤相关核蛋白多肽异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，该方法包括：检测编码所述多肽的核酸序列中是否存在突变。

在本发明的第九方面，提供了本发明多肽和编码序列的用途。例如本发明多肽可被用于筛选促进人肿瘤相关核蛋白多肽活性的激动剂，或者筛选抑制人肿瘤相关核蛋白多肽活性的拮抗剂、或者被用于肽指纹图谱鉴定。本发明的人肿瘤相关核蛋白的编码序列或其片段，可被作为引物用于PCR扩增反应，或者作为探针用于杂交反应，或者用于制造基因芯片或微阵列。