[发明专利]组合靶基因自动检测方法及采用该方法的检测仪无效
申请号: | 99123578.9 | 申请日: | 1999-11-10 |
公开(公告)号: | CN1261667A | 公开(公告)日: | 2000-08-02 |
发明(设计)人: | 府伟灵;汪江华;刘明华;王颖莹 | 申请(专利权)人: | 重庆西南医院 |
主分类号: | G01N33/50 | 分类号: | G01N33/50 |
代理公司: | 北京元中专利事务所 | 代理人: | 王明霞 |
地址: | 400038 重庆市沙*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 组合 基因 自动检测 方法 采用 检测 | ||
1、一种组合靶基因自动检测方法,其特征在于所述的检测方法是利用微细加工技术直接在石英晶体上刻蚀出超簿石英谐振器阵列,将大量探针对应地固定于镀有金属膜层的石英谐振器阵列上形成微型石英谐振阵列基因传感器芯片,在芯片二端通过银电极施加电压得到一固定的频率,然后使探针在溶液中同与之互补的标本(寡核苷酸)进行杂交,测定杂交过程的质量负载和粘性耦合的变化通过导致芯片的频率值,即可得出是否杂交以及杂交的数量。
2、根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于所述的微型石英谐振阵列基因传感器芯片包括被刻蚀成阵列的AT切石英晶体3,在石英晶体的下表面镀有金属膜层4,在石英晶体阵列的上表面镀有呈相同阵列的金属膜层2,在呈阵列的上金属膜层2的上表面固化有探针阵列层1,相应的探针7处固定有电极6,下金属膜层与基座5热压键合。
3、根据权利要求1或2所述的检测方法,其特征在于所述的阵列所形成的块数至少为一个,优选至少为六个,最好至少为九个;
4、根据权利要求1或3所述的检测方法,其特征在于所述的阵列的块数和被固化的探针1的数量是相同的;所述的阵列所呈现的块之间设有沟槽9;
5、根据权利要求1或所述的检测方法,其特征在于所述的金属膜层可以是金膜层或银膜层;所述的电极是银电极;所述的基座是玻璃基座;
7、根据权利要求1或所述的检测方法,其特征在于所述的阵列中阵列中固化有同样探针中的一个被作为参比检测探针;所述的探针是已知基因片断;所述的芯片阵列上可标记同种或不同种类的探针。
8、根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于所述的探针固化方法包括吸附法、共价键合法和组合法;优选采用巯基进行末端修饰,即巯基共价键结合法。
9、根据权利要求1或所述的检测方法,其特征在于所述的标本是先进行PCR扩增的,或采用实时PCR扩增的。
10、根据权利要求1所构造的靶基因组自动检测仪,其特征在于所述的检测仪设有微型石英谐振阵列基因传感器芯片,芯片设置在杂交反应系统种,所述的杂交反应系统是由基座、芯片、电极导线构成;杂交反应系统将标本和探针接触后的频率变化参数以及对比检测参数的数据反馈给数据采集及处理系统,所述的数据采集及处理系统包括了多道测试采集和实时中央信号处理,所述的多道测试采集实际上是对多个压电石英晶体上的探针或一块压电石英晶体阵列上的多个探针因和标本结合而产生的参数的变化依序采集;实时中央信号处理最终以分道数据显示、数据综合处理、图像显示得以表现。
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