[发明专利]一种新的多肽——人表皮生长因子受体蛋白25和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人表皮生长因子受体蛋白25，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

表皮生长因子受体是一个跨膜糖蛋白，表皮生长因子与其膜外区域结合会激活复杂的酪氨酸激酶活性，膜内区域自身磷酸化，激活细胞信号传导通路，促进细胞分裂。表皮生长因子受体可通过与细胞内含SH2结构域的信号蛋白作用，刺激Ras-Raf-MAPK信号途径，最终影响至细胞核内基因转录与表达过程。

在细胞分裂信号传导过程中，SH2结构在指导蛋白相互作用中起重要作用。有许多含SH2的无催化活性的蛋白与此通路有关。其中一种是Shc。在表皮生长因子受体激活的细胞中，Shc的酪氨酸残基磷酸化，并与Grb2/Ash形成复合物。已经知道Grb2/Ash与一种Ras鸟嘌呤交换因子，Sos，耦联。在鼠纤维原细胞中超量表达Shc蛋白会引起该细胞的转化。另外，在PC12细胞中超量表达此蛋白会引发细胞分化。这些发现表明Shc蛋白将Grb2/Ash与EGF受体耦联，并在Ras信号通路上起作用。

Shc蛋白作为表皮生长因子的受体蛋白调控着细胞分裂和分化、基因转录和表达等重要生理过程。因此Shc蛋白可以用来治疗或预防由于上述生理过程异常而导致的疾病。例如发育失常、肿瘤等等。

本发明人的蛋白与鼠的Shc蛋白在蛋白水平上有52％的同源性，且包含几个鼠Shc保守的氨基酸残基，基于以上各点，故认为本发明的新基因为一编码人与Shc蛋白相似的基因，命名为人表皮生长因子受体蛋白。并以此推断其与鼠Shc蛋白具有相似的生物学功能。

由于如上所述人表皮生长因子受体蛋白25蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人表皮生长因子受体蛋白25蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人表皮生长因子受体蛋白25蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人表皮生长因子受体蛋白25以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人表皮生长因子受体蛋白25的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人表皮生长因子受体蛋白25的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人表皮生长因子受体蛋白25的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人表皮生长因子受体蛋白25的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人表皮生长因子受体蛋白25的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人表皮生长因子受体蛋白25异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中6-698位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-1258位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人表皮生长因子受体蛋白25蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。

本发明还涉及一种体外检测与人表皮生长因子受体蛋白25蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本发明多肽的量或生物活性。