[发明专利]一种新的多肽－醛/酮还原酶9和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--醛/酮还原酶9，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

醛/酮还原酶家族包括许多结构、功能依赖于NADPH的氧化还原酶和其他一些蛋白。这些酶可以参与催化还原范围广泛的羧基化合物，如糖、葡萄醛酸、醇激素以及醛、酮的一些异源物质。

醛/酮还原酶家族的成员通常由约300个氨基酸残基组成。其保守序列有3个，第一个位于N端，序列为G-(FY)-R-(HSAL)-(LIVMF)-D-(STAGC)-(AS)-X(5)-E-X-G；第二个位于中部，序列为(LIVFMY)-X(9)-(KREQ)-X-(LIVM)-G-(LIVM)-(SC)-N-(FY)(吗啡-6-脱氢酶无此结构)；第三个位于C端，序列为(LIVM)-(PAIV)-(KR)-(ST)-X(4)-R-X(2)-(GSTAEQK)-(NSL)-X(2)-(LIVMFA)(大肠杆菌假设蛋白yafB无此结构)；K是一个活性位点残基，5-磷酸-砒哆醛通过对Lys的化学修饰，进而影响酶的催化效率。

二级结构分析显示，这些蛋白质都有β8/α8桶状结构。由于一些随意选择的介入，这个桶状结构并非完全对称。

醛/酮还原酶家族由一些酶功能和结构相似的蛋白组成，这些蛋白的保守序列显示了它们在演化过程中的相关性。这些相似性可以用来解释酶底物的非专一性与不可预测性，还可以证明为什么醛糖还原酶抑制剂在治疗糖尿病并发症方面的低效及副作用。

由于如上所述醛/酮还原酶9蛋白在机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的醛/酮还原酶9蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新醛/酮还原酶9蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--醛/酮还原酶9以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码醛/酮还原酶9的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码醛/酮还原酶9的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产醛/酮还原酶9的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--醛/酮还原酶9的抗体。本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--醛/酮还原酶9的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本发明的另一个目的是提供诊断治疗与醛/酮还原酶9异常相关的疾病的方法。本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中686-934位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2717位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制醛/酮还原酶9蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。

本发明还涉及一种体外检测与醛/酮还原酶9蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本发明多肽的量或生物活性。

本发明也涉及一种药物组合物，它含有本发明多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。

本发明还涉及本发明的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于醛/酮还原酶9表达异常所引起疾病的药物的用途。