[发明专利]一种新的多肽——RCCI蛋白11和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--RCC1蛋白11，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在真核细胞周期中，核DNA复制(S期)和有丝分裂(M期)是联系在一起的。DNA复制必须在有丝分裂开始之前完成。因此，必须要有一个系统监视未复制的DNA和转导一个抑制信号以阻止有丝分裂因子的起始。DNA结合蛋白RCC1就是一个参与此过程的调节蛋白。RCC1是一个信号分子，它不但能发现未复制完的DNA，而且能产生抑制信号。RCC1突变体研究表明，它除了上诉功能之外，还有其它的细胞内调节功能。

RCC1家族蛋白有许多保守序列，甚至所有的RCC1家族蛋白保持了一个相似的结构。该家族蛋白包含7个串联的重复单位组成的结构域，每个重复单位有50-60个氨基酸残基。这些重复单位结构域组成了蛋白质的大部分区域。在重复单位区域以外由一个只有40-50个氨基酸残基的小的N端结构域。RCC1家族几乎所有的成员一般都包括以下两个保守序列：1．G-X-N-D-X(2)-[AV]-L-G-R-X-T。2．[LIVMFA]-[STAGC](2)-G-X(2)-H-[STAGLI]-[LIVMFA]-X-[LIVM]。其中，X代表任意一个氨基酸。第一个序列位于第二个重复单位的N末端，是RCC1最保守的部分。第二个序列位于每一个重复单位的C末端的保守区域，并且在重复单位里有5个拷贝。

RCC1作为真核生物染色体凝聚的调节蛋白与染色质结合，与核GTP结合蛋白ran反应，促进结合GDP的解离的同时吸收新的GTP。因此，RCC1起了促进鸟嘌咛核甘酸解离的作用。RCC1与ran的反应很可能在基因的表达中起了很重要的作用。

由于如上所述RCC1蛋白11蛋白在机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的RCCl蛋白11蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新RCC1蛋白11蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--RCC1蛋白11以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码RCC1蛋白11的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码RCC1蛋白11的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产RCC1蛋白11的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--RCC1蛋白11的抗体。本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--RCC1蛋白11的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本发明的另一个目的是提供诊断治疗与RCC1蛋白11异常相关的疾病的方法。本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中911-1186位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2020位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制RCC1蛋白11蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。

本发明还涉及一种体外检测与RCC1蛋白11蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本发明多肽的量或生物活性。

本发明也涉及一种药物组合物，它含有本发明多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。