[发明专利]一种新的多肽——二氢二砒啶合成酶9和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--二氢二砒啶合成酶9，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在高等植物叶绿体和许多细菌中，二氢二吡啶合成酶(DHDPS)特异催化二氨基庚二酸的赖氨酸合成的第一步反应。DHDPS负责催化天冬氨酸半醛基和丙酮酸的缩聚反应。该缩聚反应属于乒乓机制，丙酮酸通过与一个赖氨酸残基结合成希夫-基质再结合二氢二吡啶合成酶。赖氨酸和它的类似物能完全抑制DHDPS关于天冬氨酸半醛的活性(Bhattacharjee,j.et al..,1983 Amino Acids 229-244)。在高等植物中，这种抑制效应将以别构的方式增加抑制剂的集中(Kumpaisal,R et al.,PlantPhysio1.85,145-151)。

赖氨酸能抑制天冬氨酸激酶的同工酶，天冬氨酸激酶是所有天冬氨酸家族氨基酸代谢途径的第一个酶。天冬氨酸家族氨基酸包括：赖氨酸，苏氨酸，甲硫氨酸和异亮氨酸。在大肠杆菌中，赖氨酸合成主要受赖氨酸敏感同工酶和天冬氨酸激酶Ⅲ的调节。DHDPS催化赖氨酸合成的天冬氨酸激酶Ⅲ之后的限速步骤。同时，DHDPS也是高等植物的主要调节物。

以下是DHDPS家族的两个特征模式序列。第一个特征模式位于N末端高度保守区域的中心。第二个特征模式包括一个赖氨酸残基，这个赖氨酸残基就是那个与底物形成希夫-基质的氨基酸残基。这两个特征模式分别是：[1][GSA]-[LIVM]-[LIVMFY]-x(2)-G-[ST]-[TG]-G-E-[GASNF]-x(6)-[EQ]。[2]Y-[DNS]-[LIVMF]-P-x(2)-[ST]-x(3)-[LIVM]-x(13,14)-[LIVM]-x-[SCA]-[LIVMF]-K-[DEQAF]-[STAC]。K参与希夫-基质的形成。

赖氨酸是生物体中众多代谢途径中的重要氨基酸，它对生物体的生长发育起着重要的调节作用。因为DHDPS是赖氨酸合成的第一步，所以DHDPS的表达异常将严重影响赖氨酸的合成，进而影响到生物体的正常代谢和生长发育。

由于如上所述二氢二砒啶合成酶9蛋白在机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的二氢二砒啶合成酶9蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新二氢二砒啶合成酶9蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--二氢二砒啶合成酶9以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码二氢二砒啶合成酶9的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码二氢二砒啶合成酶9的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产二氢二砒啶合成酶9的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--二氢二砒啶合成酶9的抗体。本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--二氢二砒啶合成酶9的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本发明的另一个目的是提供诊断治疗与二氢二砒啶合成酶9异常相关的疾病的方法。本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中285-533位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2017位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。