[发明专利]一种新的多肽——人无脑回畸形蛋白43和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人无脑回畸形蛋白43，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

WD-40重复序列最早从G蛋白的β亚单位中发现。G蛋白介导信号的跨膜传导，它由α、β、γ三个亚单位组成，其中α亚单位能够结合和水解GTP,β、γ亚单位的功能不是太清楚，但发现它们在膜受体的识别，锚定和GTP取代GDP的过程中起关键作用。

在高等真核生物中，β亚单位(简称G-β)是由多个高度保守的蛋白组成的一个小的基因家族，这些蛋白质的长度约为340个氨基酸。在结构上，G-β由8个前后排列的含有40个氨基酸的重复序列组成。每个重复序列均含有一个Trp-Asp Motif(也叫作WD-40重复序列)。

该保守序列特征为：(n1)LxGHxxxIxxΦxδ  (n2)   ΦΦSGGxDxxΦxIWDδF      L               TAA  N    C LFN

   V                  S         VY或：[LIVMSTAC]-[LIVMFYWSTAGC]-[LIMSTAG]-[LIVMSTAGC]-x(2)-[DN]-

                x(2)-[LIVMWSTAC]-x-[LIVMFSTAG]-W-[DEN]-[LIVMFSTAGCN]

需要强调的是含有Trp-Asp Motif(WD-40重复序列)的蛋白，其功能不尽相同，呈多样化，细胞定位也各不相同，可在胞核，质膜和细胞骨架等。因此从该Motif推测的基因功能与实际情况相差较大。

本发明的多肽与Miller-Dieker无脑回畸形1型蛋白同源(Miller-Diekerlissencephaly protein,LISl)。Miller-Dieker无脑回畸形1型蛋白最早从人胎脑中克隆，其基因全长为2750bp，编码288个氨基酸。染色体定位17p13.3。已有证据表明，该蛋白的缺损或染色体17p13.3的缺失会导致无脑回畸形的发生，临床称之为Miller-Dieker综合症。

由于编码本发明多肽的基因与人无脑回畸形蛋白基因同源，推测该蛋白在脑皮层的发育中起重要作用，结合它的Motif功能，进一步推测该基因在信号传导过程中，尤其是跨膜信号传导过程中发挥重要作用。根据其同原蛋白在非洲爪蟾中受甲状腺激素上调这一事实，推测该蛋白受激素调控，介导甲状腺激素的功能发挥，如该蛋白发生异常，在临床上可能表现为甲状腺激素缺乏症的症状，如呆小症等。如上所述，在该基因可能与先天或后天的脑发育异常，痴呆或智力低下有密切关系。根据同源比较的结果，本发明的多肽被推断鉴定为一种新的人无脑回畸形蛋白，并命名为人无脑回畸形蛋白43。

由于如上所述人无脑回畸形蛋白43蛋白在机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人无脑回畸形蛋白43蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人无脑回畸形蛋白43蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人无脑回畸形蛋白43以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人无脑回畸形蛋白43的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人无脑回畸形蛋白43的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人无脑回畸形蛋白43的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人无脑回畸形蛋白43的抗体。本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人无脑回畸形蛋白43的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人无脑回畸形蛋白43异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；