[发明专利](R)－2－羟基－1－苯氧基丙烷衍生物的生产方法

说明书

技术领域　　本发明涉及一种生产(R)-2-羟基-1-苯氧基丙烷衍生物的方法，该方法包括用微生物等来R-选择性地还原苯氧基丙酮衍生物。(R)-2-羟基-1-苯氧基丙烷衍生物，尤其例如是3，4-二氟-2-((R)-2-(羟基丙基氧))硝基苯，是可用作合成抗菌剂的中间体的化合物。

                              背景技术

尽管迄今已经报道了几种通过微生物学方法还原苯氧基丙酮衍生物的技术，但是知道，例如在采用面包酵母时，通常会因Prelog规则(Acat．Chem．Scand．，48(6)，506，1994)而优先产生S-化合物。因此，已知具有R-选择性还原苯氧基丙酮衍生物能力的微生物是非常少的，至今还没有发现有一种微生物能够进行严格地R-选择性还原。例如，采用热厌氧杆菌属(Thermoaerobacter)微生物的R-选择性还原技术是已知的，但是产物的光学纯度至多只有90％ee(日本公开出版物平-8-266292)。采用棒杆菌属(Corynebacterium)微生物的R-选择性还原2-丙酮基氧-3，4-二氟硝基苯的技术也是已知的，但是产物的光学纯度只有大约88．4％ee(日本公开出版物平-5-68577)。采用真菌菌株来R-选择性还原2-丙酮基氧-3，4-二氟硝基苯的技术也是已知的，但是其产物的光学纯度只有大约84-94％ee，另外，可以采用的底物浓度非常低，因而使得产量也不可避免地低(日本公开出版物平-3-183489)。当采用微生物细胞时，细胞中存在的S-选择性羰基还原酶有减损产物光学纯度的趋势。因此，已经开发出R选择性还原苯氧基丙酮的技术，该技术包括采用纯化的R选择性乙醇脱氢酶、辅酶以及辅酶再生所需的酶。然而，并不能说该技术是特别有用的，其部分原因是产物的光学纯度不够高，部分原因是技术需要高成本的纯化酶(USP 5385833)。

因此，为了使这些利用微生物等的还原技术成功用于工业规模的生产，这些技术必定有需要改进之处，因为1)产物的光学纯度不如任何制药原料所要求的那样高，2)低的底物浓度引起低的产量和／或3)需要昂贵的纯化酶。

                             发明概述

本发明的发明者对(R)-2-羟基-1-苯氧基丙烷衍生物(它有作为药剂中间体的价值，尤其是3，4-二氟-2-((R)-2-(羟丙基氧))硝基苯，它可用作合成抗菌剂的中间体)的高光学纯度和高效生产进行了广泛深入的调查，发现一种羰基还原酶能将低成本购得的苯氧基丙酮衍生物R-高选择性地、高效地还原成(R)-2-羟基-1-苯氧基丙烷衍生物。由此而产生了本发明。

因此，本发明涉及一种生产通式(1)的(R)-2-羟基-1-苯氧基丙烷衍生物的方法：

其中R代表苯氧基或取代的苯氧基，

该方法包括用一种羰基还原酶还原通式为(2)的苯氧基丙酮衍生物的步骤：

其中R如上所述，

该羰基还原酶从念珠菌属微生物或能合成所述羰基还原酶的微生物的肉汤培养基或经加工的肉汤培养基衍生获得，该方法还包括回收具有所述通式(1)的产物(R)-2-羟基-1-苯氧基丙烷衍生物的步骤。

现在将详细描述本发明。

                               发明详述

参看上式(1)和(2)，R代表一个苯氧基或取代的苯氧基，该取代的苯氧基包括对硝基苯氧基、对氨基苯氧基、对氯苯氧基、对溴苯氧基、3，5-二硝基苯氧基、2，3-二氟-5-硝基苯氧基等，较佳的是2，3-二氟-5-硝基苯氧基。

参看用作本发明中原料的通式(2)的苯氧基丙酮衍生物，例如已经知道，2-丙酮基氧-3，4-二氟硝基苯易通过2，3-二氟-5-硝基苯酚与氯丙酮在强碱存在下的反应来合成(日本公开出版物昭-61-246151)。

作为能进行R-选择性还原的羰基还原酶，能被提及的是从念珠菌属微生物、较佳的是Candida magnoliae、更佳的是Candida magnoliae IFO0705衍生获得的酶。