[发明专利]粒子轰击转化芸苔属植物

权利要求书

1．一种产生转化的芸苔属植物细胞的方法，所述方法包括下列步骤：

(a)用核酸包覆的微粒轰击从非胚胎芸苔属植物组织制得的细胞，形成经轰击的细胞制备物；和

(b)鉴定出已用所述核酸转化了所述经轰击制备物的细胞。

2．根据权利要求1所述的方法，其中从非胚胎芸苔属植物组织制得的所述细胞是二倍体。

3．根据权利要求1所述的方法，其中所述非胚胎芸苔属植物组织来自芸苔属植物的幼苗。

4．根据权利要求3所述的方法，其中所述幼苗是4至6天龄的不育的幼苗。

5．根据权利要求1所述的方法，其中通过将所述组织切成至少一片并使所述至少一片与诱导培养基接触的方法从非胚胎芸苔属植物组织制得所述受轰击细胞。

6．根据权利要求1所述的方法，其中通过以下方法从非胚胎芸苔属植物组织制得所述受轰击细胞，该方法是在大致横向上切开幼苗的下胚轴，形成至少一片下胚轴片，纵向切开所述至少一片下胚轴片，使所述纵向切片中的至少一片与诱导培养基接触。

7．根据权利要求1所述的方法，其中通过将所述组织浸软成细胞浆的方法从非胚胎芸苔属植物组织制得所述受轰击细胞。

8．根据权利要求1所述的方法，其中通过在诱导培养基中将幼苗上部浸软形成细胞浆的方法从非胚胎芸苔属植物组织制得所述受轰击的细胞，所述上部包括芽尖、子叶和10-50％的下胚轴。

9．根据权利要求7所述的方法，其中富集所述细胞浆中大小为46微米至230微米的细胞物质。

10．根据权利要求1所述的方法，其中所述核酸编码多肽或调节多肽的表达。

11．根据权利要求1所述的方法，其中所述核酸包括反义分子。

12．根据权利要求1所述的方法，其中所述核酸包括核酶。

13．根据权利要求1所述的方法，其中所述核酸包括反义寡核苷酸。

14．根据权利要求1所述的方法，其中所述芸苔属植物组织来自选自蔓菁、黄芥子、Brassica carinata、黑芥、甘蓝和油菜的芸苔属植物种类。

15．根据权利要求1所述的方法，其中所述鉴定包括将所述受轰击的细胞培养在浮选装置上与液体选择培养基接触，选出在所述选择培养基存在下存活的那些细胞。

16．根据权利要求1所述的方法，其中所述方法还包括从所述经鉴定的细胞再生出芸苔属植物的步骤。

17．根据权利要求16所述的方法，其中所述再生步骤包括将所述经鉴定的细胞培养在浮选装置上与液体再生培养基接触。

18．用权利要求1所述的方法产生的芸苔属植物细胞及其后代。

19．一种培养芸苔属植物组织的方法，所述方法包括在液体选择培养基或液体再生培养基存在下在浮选装置上培养所述组织。