[发明专利]3(R)－与3(S)－羟基－1－甲基－4－(2,4,6－三甲氧基苯基)－1,2,3,6－四氢吡啶或其羧酸酯对映体的酶催分离方法

说明书

本发明涉及光学纯的式(Ⅰ)化合物的制备方法，该方法借助一种酶进行对映体混合物的立体分化反应。

3(S)-与3(R)-羟基-1-甲基-4-(2，4，6-三甲氧基苯基)-1，2，3，6-四氢吡啶(式(Ⅰ)中R=H的化合物)或其酯衍生物(式(Ⅰ)中R=COR¹的化合物)是下列物质合成的重要单元或前体：专利申请HMR 98／L 001(“(-)顺式-3-羟基-1-甲基-4(R)-(2，4，6-三甲氧基苯基)哌啶的制备方法”)中描述的flavopiridol(HMR 1275或L 86 8275)、cyclin-依赖性蛋白激酶的第一种强效抑制剂(例如参见Sedlacek，Hans Harald；Czech，Joerg；Naik，Ramachandra；Kaur，Gurmeet；Worland，Peter；Losiewicz，Michael；Parker，Bernard；Carlson，Bradley；Smith，Adaline等“Flavopiridol(L868275；NSC 649890)，用于肿瘤治疗的一种新的激酶抑制剂”《国际肿瘤学杂志》(Int．J．Oncol．)(1996)，9(6)，1143-1168或Czech，Joerg；Hoffmann，Dieter；Naik，Ramachandra；Sedlacek，Hans-Harald“黄酮L 86 8275的抗肿瘤活性”《国际肿瘤学杂志》(1995)，6(1)，31-36)。

式(Ⅰ)化合物的外消旋物拆分或对映体分离是未知的。

现已发现，通过酶催酯裂解(水解或醇解)可以从对映体混合物得到式(Ⅰ)化合物的光学纯形式。

本发明因此涉及式(Ⅰ)化合物外消旋物的动态拆分方法，其中R是COR¹，其中R¹=(C₁-C₁₆)-烷基、(C₂-C₁₆)-烯基或(C₃-C₁₆)-炔基、C_nH_2n-环烷基，其中n=1-16，它们可以是支链或非支链的，并且可以被1-3个取代基取代，取代基选自F、Cl、Br、I、CF₃、CN、NO₂、羟基、甲氧基、乙氧基和COOR²，其中R²=(C₁-C₄)-烷基和(C₂-C₄)-烯基，它们可以是支链或非支链的并且可以被1-3个取代基取代，取代基选自F、Cl、Br、CF₃，该方法包括在均相或多相、含水、含水／有机或有机介质中，在一种酶的存在下，例如一种脂肪酶或酯酶，例如来自哺乳动物肝脏或胰腺或微生物来源，例如来自假丝酵母属(Candida)、假单胞菌属(Pseudomonas)和曲霉属，或者一种蛋白酶，例如来自芽胞杆菌属，在有或没有助溶剂和缓冲剂的存在下，将式(Ⅰ)化合物的对映体混合物或外消旋混合物在10-80℃温度下进行立体选择性水解或醇解，其中反应混合物优选地含有2-50重量％的酯，在反应已经发生后，分离未反应的酯(式(Ⅰ)中R=COR¹的化合物)和所生成的醇(式(Ⅰ)中R=H的化合物)，以及因此两种对映体。

根据本发明的方法是经济、简单和快速的。反应不需要任何等摩尔量的光学纯助剂、昂贵的试剂、不相称大量的溶剂和任何耗费的操作步骤。反应完成后，可以采取简单的措施进行产物或对映体的分离，例如萃取。

优选地，在式(Ⅰ)化合物中，R是COR¹，其中R¹=(C₁-C₁₂)-烷基、(C₂-C₁₂)-烯基或(C₃-C₁₂)-炔基、C_nH_2n-环烷基，其中n=1-12，它们可以是支链或非支链的，并且可以被1-3个取代基取代，取代基选自F、Cl、Br、CF₃、CN、NO₂、羟基、甲氧基、乙氧基和COOR²，其中R²=甲基、乙基和乙烯基，它们可以被1-3个取代基取代，取代基选自F、Cl、CF₃。