[发明专利]通过鼻内接种IL－12加强免疫性

说明书

相关申请

本申请是于1998年3月5日递交的美国申请No.09/035,188的部分继续，前一申请通过在此引述而全文引入本文。

发明背景

粘膜表面是细菌和病毒入侵的主要门户，因此该表面构成了宿主的防御体系的第一界限。这样，加强粘膜免疫性的免疫接种策略对于阻止感染性疾病具有实际的意义。但是大多数非肠道给药的疫苗在诱导最佳粘膜免疫性时仅仅部分有效。因此，需要能够加强粘膜免疫性和以安全，非入侵的方式释放的佐剂。

发明概述

如本文所述，鼻内白细胞介素(IL-12)治疗可以有效地加强抗原特异性的免疫应答并且加强粘膜疫苗的免疫接种策略。因此，本发明涉及加强和/或诱导宿主(例如哺乳动物，包括人)对病原体的免疫应答(例如全身的，粘膜的)，它包括以有效量的IL-12和病原体的抗原(例如蛋白质，碳水化合物，脂类，重组DNA，整个生物体，毒素，有机分子)给宿主鼻内给药。如本文所述，免疫应答是抗原特异性的。另外，免疫应答导致Th1型的细胞因子应答(例如干扰素-γ)和/或体液应答(例如IgG2a,IgG2b,IgG3)的加强表达。

在一个实施方案中，本发明涉及加强宿主对病原体的免疫应答的方法，包括以有效量的IL-12和病原体的抗原给宿主鼻内给药。在另一个实施方案中，本发明涉及诱导宿主对病原体的免疫应答的方法，包括以有效量的IL-12和病原体的抗原给宿主鼻内给药。

在一个特定的实施方案中，本发明涉及诱导宿主对粘膜病原体的免疫应答的方法，它包括以有效量的IL-12和病原体的抗原给宿主鼻内给药。

本发明还包括诱导宿主对病原体的Th1类似的免疫应答的方法，包括它包括以有效量的IL-12和病原体的抗原给宿主鼻内给药。

本发明还涉及加强宿主对病原体的粘膜免疫应答的方法，包括它包括以有效量的IL-12和病原体的抗原给宿主鼻内给药。

如本文所述的以IL-12鼻内给药有效地加强粘膜和全身腔室中抗原特异性的应答的结果，证明以IL-12鼻内给药可用于获得对抗病原体的免疫接种策略有效的潜在的疫苗佐剂，例如粘膜病原体。

附图简述

附图1A-1C是显示以IL-12鼻内给药对呼吸道粘膜免疫应答的作用的条块图；数据以每组4个小鼠的平均光密度(O.D.)+/-SEM表示；以对应于滴定曲线的线性部分的稀释度测试支气管肺泡的灌洗(对于IgG1和IgA1∶64，对于IgG2a为1∶8)。

附图2A-2E是血清稀释的倒数的O.D.405nm的图，显示鼻内IL-12给药对全身抗体应答的作用；实心标记代表用DNP-OVA+IL-12注射的动物，空心标记代表用DNP-OVA+磷酸缓冲的盐水(PBS)的动物；各个线代表抗体与单个小鼠的结合。

附图3A-3B是显示鼻内IL-12给药对总Ig水平的作用的条块图；该数据以每组4个小鼠的平均光密度(O.D.)+/-SEM表示；以对应于滴定曲线的线性部分的稀释度测试血清(对于IgG1为1∶6400，对于IgG2a为1∶200)。

附图4A-4F是显示IL-12非肠道和鼻内给药对粪便粘膜应答的作用的条块图；所显示的数据代表第21天时对IgA的抗体应答和第28天时对IgG异型的应答，各个反应性应答的峰，该数据以每组4个小鼠的平均光密度(O.D.)+/-SEM表示。

附图5A-5B是血清稀释的倒数的O.D.405nm的图，显示鼻内IL-12给药对全身抗体应答的作用；在0天以纯化的来自于流感病毒的血凝素和神经氨酸酶(HANA)免疫接种小鼠和以IL-12(闭合的三角)或磷酸缓冲盐水(PBS)载体(开口的环)在0,1,2和3天鼻内治疗的小鼠；采用HANA-包被的微滴板异型-特异性的ELISA测定第14天时血清抗-HANA抗体的水平；各条线代表来自于单个小鼠的抗体的结合。

附图6A-6B是血清稀释的倒数的O.D.405nm的图，显示鼻内IL-12给药对全身抗体应答的作用；在0天以HANA免疫接种小鼠和以IL-12(闭合的三角)或PBS载体(开口的环)在0,1,2和3天鼻内治疗的小鼠；在14天时加强接种；采用HANA-包被的微滴板异型-特异性的ELISA测定第28天时血清抗-HANA抗体的水平；各条线代表来自于单个小鼠的抗体的结合。