[发明专利]突变的重组过敏原

说明书

发明领域

本发明涉及新型重组过敏原，它是来自天然存在的过敏原的非天然存在的突变体。另外，本发明涉及制备该重组过敏原的方法，还涉及含有该重组过敏原的药用组合物，包括疫苗。在另一实施方案中，本发明涉及在受试者中产生免疫应答，接种或治疗受试者的方法以及制备本发明的组合物的方法。

发明背景

遗传上易感的个体可被个体所接触的各种环境来源产生的抗原或过敏原致敏(过敏反应)。当以前致敏的个体再接触相同或同源的过敏原时发生过敏反应。过敏反应的范围从枯草热，鼻传导疾病，鼻炎和哮喘到全身性过敏病和由于，例如，蜜蜂或大黄蜂螯伤或昆虫咬伤引起的死亡。该反应是即时的且可由各种特异反应性过敏原引起，例如，由草类，树木，杂草，昆虫，食物，药品，化学试剂和香水产生的化合物。

然而，当个体首次接触过敏原时不出现这类反应。开始的适应性应答需要时间且通常不引起任何症状。但当已产生能与过敏原反应的抗体和T细胞时，任何随后的接触可能激发症状。因此，过敏反应表明免疫应答本身可引起威胁生命的重大病理学状态。

特异反应性过敏反应涉及的抗体主要属于IgE型免疫球蛋白。IgE与肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面上的特异性受体结合。特定的过敏原与结合于肥大细胞上的IgE形成复合物后，受体在细胞表面交联，导致通过该受体产生信号传导和靶细胞的生理反应。脱粒导致释放组胺，肝素，嗜酸性白细胞趋化因子，白三烯C4，D4和E4，它们引起支气管平滑肌细胞持续收缩。在自然情况下产生的效应可以是全身性的或是局部的。

抗体介导的过敏性反应可分成4类，即Ⅰ型，Ⅱ型，Ⅲ型和Ⅳ型。Ⅰ型过敏反应是典型的即时过敏反应，在接触抗原后几秒或几分钟内发生。这些症状由过敏原特异性IgE介导。

通常，观察到的过敏反应是对存在于诸如花粉，室内粉尘螨，动物毛发和头皮屑，毒液和食品中的蛋白质过敏原发生的反应。

为了减小或消除过敏反应，通常使用仔细控制和重复地施用过敏反应疫苗。传统上经过肠胃外，鼻内或舌下用药进行过敏反应疫苗接种，在相当长的时间期间内不断增加剂量，导致病人脱敏。尚未知道精确的免疫学机制，但据认为在过敏原特异性T细胞表型方面诱导的差异特别重要。

结合抗体的表位(B-细胞表位)

Fab-抗原复合物的X-射线晶体学分析增进了对结合抗体的表位的了解。根据这类分析，结合抗体的表位可定义为含有15-25个氨基酸残基的原子的抗原表面部分，它们在与能直接相互作用的抗体原子保持在一定的距离内。抗原-抗体相互作用的亲和性不能单独从范德华相互作用，氢键或离子键产生的焓来推测。其能量贡献的大小相似于水分子从界面几乎完全脱去所需的熵。这意味着相互作用的分子外形之间的完全匹配是进行抗原-抗体高亲和性相互作用的主要因素。

过敏反应的疫苗接种

疫苗接种的概念以免疫系统的两个基础特征，即特异性和记忆性为基础。疫苗接种引发受体的免疫系统，当重复接触相似蛋白时，免疫系统将诸如微生物感染之类的攻击发生更强烈的应答。疫苗是用于接种以在受体中产生这种保护性免疫反应的蛋白混合物。保护仅包括存在于疫苗中的成份和同源抗原。

与其它类型的疫苗接种相比，过敏反应接种由于在过敏反应病人中存在正进行的免疫反应而复杂化。这种免疫反应的特征在于存在过敏原特异性IgE，当接触过敏原时介导过敏反应症状出现。因此，使用来自天然来源的过敏原进行过敏反应接种具有内在的危险，其副作用的最坏后果可能会威胁患者的生命。

围绕该问题的研究方法可分成3类。在实际中常结合使用多类方法。第一类方法包括在较长的时间内施用一些小剂量以达到较大的累积剂量。第二类方法包括将过敏原掺入诸如氢氧化铝的胶体物质中对过敏原进行物理修饰。氢氧化铝制剂具有佐剂效应和延缓过敏原释放以降低活性过敏原成份的组织浓度的贮藏效应。第三类方法包括化学修饰过敏原以降低过敏原性，即IgE结合。