[发明专利]含有病毒的组合物以及浓缩病毒制剂的方法

权利要求书

1．在含有多羟基烃、在约2℃-27℃温度范围内缓冲维持pH约7-约8.5的配方中含有病毒的组合物。

2．权利要求1的组合物，其中所述病毒为重组病毒。

3．权利要求1的组合物，其中所述多羟基烃是甘油。

4．权利要求1的组合物，还含有双糖。

5．权利要求1的组合物，其中所述组合物包括含有浓度约0.5-10mg/mL的磷酸二氢钠二水合物和浓度约0.5-10mg/mL的氨基丁三醇的缓冲体系。

6．权利要求1的组合物，还含有浓度约0.1-1mg/mL的二价金属盐。

7．权利要求1的组合物，它还含有包括水的稀释剂。

8．权利要求1的组合物，其中所述病毒浓度约为1×10⁹-1×10¹³颗粒/mL。

9．权利要求1的组合物，其中所述病毒是腺病毒。

10．权利要求2的组合物，其中所述重组病毒包括野生型p53基因。

11．权利要求10的组合物，其中所述重组病毒为A/C/N/53。

12．权利要求1的组合物，其中所述病毒为腺病毒；所述多羟基烃为甘油；所述缓冲体系在20℃-27℃温度范围下将pH维持于约7.3-约7.9范围；以及所述组合物还含有双糖。

13．权利要求12的组合物，其中所述腺病毒是A/C/N/53；所述双糖是蔗糖；所述缓冲体系包括磷酸二氢钠二水合物和氨基丁三醇；以及所述组合物还含有二价金属盐和水。

14．浓缩病毒制剂的方法，包括：

(a)向病毒制剂中加入多羟基烃至多羟基烃终浓度约20％或以上；以及

(b)使所述病毒制剂经过一个过滤过程，其中对所述制剂施加压力，以致通过滤器从病毒制剂中去除稀释剂而保留病毒，从而增加病毒浓度。

15．权利要求14的方法，其中所述过滤方法包括超滤。

16．权利要求14的方法，其中所述过滤方法包括切向流过滤。

17．纯化病毒制剂的方法，包括：

(a)使病毒制剂经过阴离子交换色谱法，其中从阴离子交换色谱法的介质中洗脱作为病毒制剂产品的病毒；

(b)向步骤(a)病毒制剂产品中加入多羟基烃，使制剂中的多羟基烃浓度达到约25％或以上；以及

(c)通过对所述制剂施用压力，以致通过滤器从病毒制剂中去除稀释剂而保留病毒，从而提高步骤(b)病毒制剂产品中的病毒的浓度；以及

(d)使步骤(c)的浓缩病毒制剂产品经过一次或多次另外的加工步骤。

18．权利要求14的方法，其中所述病毒为重组病毒。

19．权利要求14的方法，其中所述病毒为携带有用于基因治疗的治疗转基因的重组病毒。

20．权利要求17的方法，其中所述另外的加工步骤包括尺寸排阻色谱法。

21．权利要求17的方法，其中所述步骤(c)的方法包括切向流过滤。

22．权利要求21的方法，其中所述步骤(c)的方法采用包括PelliconXL过滤系统的装置实施。

23．用权利要求14的方法浓缩的病毒制剂。

24．用权利要求17的方法纯化的病毒制剂。

25．浓缩病毒制剂的方法，包括：

(a)离心包括如下层的组合物：包含35％-80％(v/v)浓度的多羟基烃的第一层，所述第一层上覆盖含有5％-30％(v/v)浓度的多羟基烃的第二层，第二层上覆盖含有病毒的第三层；和

(b)从第一层回收所述病毒。

26．权利要求1的组合物，其中使所述组合物经过另外的加工步骤：搅拌、然后微量过滤，从而防止所述组合物在贮藏期间形成颗粒。

27．权利要求1的组合物，其中所述组合物经过一个或多个冻/融循环，搅拌后再进行微量过滤，从而防止所述组合物在贮藏期间形成颗粒。

28．权利要求12的组合物，还含有浓度约0.6-10.0mg/mL的一价金属盐。