[发明专利]花粉特异性启动子

权利要求书

1．重组核酸序列，所述核酸序列含有玉米ZmC5基因的启动子序列或其变体或其片断并可用作花粉中的启动子。

2．权利要求1的重组核酸序列，其含有由下文图1所示的玉米ZmC5基因转录起始位点上游约2kb序列。

3．权利要求1或2的重组核酸序列，其含有启动子序列或其变体或其片断，所述启动子序列至少含有图5所示DNA序列的一部分或至少含有与图5所述的启动子具有基本类似活性的启动子的编码序列的一部分。

4．表达盒，其含有权利要求1至3中任一项的核酸序列，其中处于适当位置的表达盒可以控制需要在花粉中表达的基因，所述基因编码的产物对花粉产生，杀昆虫毒素，或增强或修饰花粉的营养价值有影响。

5．权利要求4的表达盒，其中所述基因含有对花粉发育有害的基因。

6．权利要求5的表达盒，其中所述基因含有编码芽孢杆菌RNA酶，腺嘌呤核苷酸转运蛋白，突变的微管蛋白，T-urf或海藻糖磷酸磷酸酶(TPP)或核酶的基因。

7．权利要求4的表达盒，其中所述基因含有选择标记基因。

8．权利要求7的表达盒，其中选择标记基因含有抗生素抗性基因。

9．表达系统，其含有权利要求4至8中任一项的表达盒。

10．权利要求9的表达系统，其含有对花粉有害的基因，还含有表达盒，所述表达盒含有与可被化合物诱导的启动子可操作相连的第二核酸序列，所述核酸序列编码能克服所述有害基因影响的肽或蛋白质。

11．权利要求10的表达系统，其中所述核酸序列含有恢复基因。

12．权利要求11的表达系统，其中所述恢复基因是芽孢杆菌RNA酶抑制剂或TPS。

13．权利要求10的表达系统，其中所述核酸序列编码对所述有害基因而言为有义或反义的构建体以抑制其表达。

14．权利要求10的表达系统，其中所述第二核酸序列编码lac,tet,434,lac-His的阻抑蛋白，它与同权利要求1至3中任一项的核酸序列或Amplicon^TM可操作相连的操纵基因序列相互作用以阻止需要在花粉中表达的第一基因的表达。

15．权利要求10至14任一项的表达系统，其中可诱导的启动子是AlcA/R,GST或可被蜕皮激素诱导的启动子。

16．权利要求9至15任一项的表达系统，其进一步含有选择标记。

17．权利要求9至16任一项的表达系统，其中需要在花粉中表达的基因与除草剂抗性基因相连。

18．表达系统，其含有

(a)在花粉中特异性表达的第一启动子序列；

(b)第一基因，当它所述花粉特异性启动子的控制之下表达时能破坏花粉生物发生；

(c)第二启动子序列，其对外源性化学诱导剂的存在或缺乏有所反应；和

(d)第二基因，它编码可抑制所述第一基因的表达，或可抑制所述第一蛋白质的元件，并与所述第二启动子序列可操作相连并受该启动子序列的控制。

19．生产植物的方法，所述方法包括用权利要求9至18任一项的表达系统转化植物细胞。

20．植物细胞，其含有权利要求9至18任一项的表达系统。

21．含有权利要求20的细胞的植物。

22．诱导植物雄性不育的方法，所述方法包括用权利要求10至18任一项的表达系统转化植物。

23．控制植物能育性的方法，所述方法包括用权利要求11或权利要求18的表达系统转化所述植物，当能育性需要被恢复时，激活诱导型启动子。

24．权利要求23的方法，其中通过给植物使用化合物来激活诱导型启动子。

25．可复制的病毒RNA载体(Amplicon^TM)，其含有权利要求1至3任一项的重组核酸。

26．转化花粉的方法，所述方法包括用权利要求9或权利要求18的表达系统转化花粉细胞。

27．参照任一附图，基本上如上所述的重组核酸，表达盒，表达系统或方法。